内容摘要：卡尔·费休法是一种以滴定法测定水分的化学分析法。其测定水分的原理是基于食品中的水与碘和二氧化碳的定量反应。
1.卡尔·费休法是一种以滴定法测定水分的化学分析法。其测定水分的原理是基于食品中的水与碘和二氧化碳的定量反应。
2.主要试剂
①无水甲醇：要求含水量应在0.05%以下。量好甲醇约200mL，置干燥圆底烧瓶中，加表面光洁的镁条(或镁屑)15g与碘0.5g，加热回流至金属镁开始转变为白色絮状的甲醇镁。再加入甲醇800mL，继续回流至镁条溶解。分馏，收集64~65℃馏出的甲醇，用干燥的吸滤瓶作接受器。冷凝管的顶端和接受器支管上要置氯化钙干燥管。
②无水吡啶：要求含水量在0.1%以下。脱水方法：取吡啶200mL，置于干燥的蒸馏瓶中，加苯40mL，加热蒸馏。收集110~116℃馏出的吡啶。
③碘：将碘置于硫酸干燥器内，干燥48h以上。
卡尔·费休试剂的浓度由碘的浓度决定。新配制的卡尔·费休试剂不稳定，混合后需放置一段时间后才能使用，每次使用前均需标定。
④卡尔·费休试剂的配制：取无水吡啶133mL，碘42.33g，置于带塞烧瓶中，冷却(冰盐浴)。振摇至碘全部溶解后，加入无水甲醇333mL。，称重。待烧瓶充分冷却后，通入干燥的二氧化硫至质量增加32g，密塞、摇匀。在暗处放24h，待标定。
⑤卡尔·费休试剂的标定：卡尔·费休试剂的浓度可用标准水溶液进行标定，也可以用稳定的水合盐标定。滴定水分的终点，可用试剂本身中的碘作为指示剂，试液中有水存在时，呈淡黄色，接近终点时呈琥珀色，当刚出现微弱的黄棕色时，即为滴定终点，棕色表示有过量碘存在。这种确定终点的方法适宜于含有l%或更多水分的食品。若测定食品中的微量水分或测定深色样品时，常用“永停法”确定。“永停法”即双指示电极安培滴定法，滴定至微安表指针偏转至一定刻度并保持1min不变，既为终点。
a.用重蒸馏水标定
取50mL的干燥带标准磨口的圆底烧瓶，加入40mL无水甲醇，加热回流15min，移开热源，静置15min，使附着在冷凝器内壁上的液体流下来。取干燥的反应瓶，用干燥的氮气驱除反应瓶中的水汽。准确加入重蒸馏水约30mg，加入无水甲醇2～5mL，不断搅拌，用卡尔·费休试剂滴定至溶液颜色由淡黄色变为黄棕色即为终点。另做空白校正。整个滴定操作都在氮气流中进行。计算：
F=m/(V1-V2)
式中：F——每毫升卡尔·费休试剂相当于水的克数(卡尔·费休试剂对水的滴定度);
M——称取重蒸馏水的质量(mg);
V1——标定所消耗卡尔·费休试剂的毫升数;
V2——空白所消耗卡尔·费休试剂的毫升数。
b.用水合盐标定
常用三水合醋酸钠(CH3COONa·3H2O)，其理论含水量为39.72%;二水合酒石酸钠(Na2C4H406·2H2O)，其理论含水量为15.66%。
以三水合醋酸钠标定如下：准确称取三水合醋酸钠(120℃干燥4h)约0.4g于干燥的50mL圆底烧瓶中，加入40mL无水甲醇，立即加塞，摇动至试剂完全溶解。取10.00ML,该溶液进行滴定。另取10.00mL无水甲醇做空白试验。
计算：
F=mX(10/40)/(V1-V2)
式中：X——三水合醋酸钠水分的质量分数。%;
F——每毫升卡尔·费休试剂相当于水的克数(卡尔·费休试剂对水的滴定度);
m——称取三水合醋酸钠的质量(mg);
V1——标定所消耗卡尔·费休试剂的毫升数;
V2——空白所消耗卡尔·费休试剂的毫升数。
3.食品水分的测定
准确称取适量样品(约含水100mg)于50mL.干燥的圆底烧瓶中，加人40mL。无水甲醇，立即装好冷凝器，加热，沸腾回流15min后停止加热，静置15min，取下冷凝管加盖。吸取10.OOmL。萃取液于反应瓶中，不断搅拌，用卡尔·费休试剂滴定至终点。空白试验：另取40mL无水甲醇，按以上操作回流后，吸取10.OOmL，用卡尔·费休试剂滴定至终点(整个滴定过程在氮气流中进行)。.
4.计算
Y=0.4(F(V1-V0)/m
式中：y——样品中水分的质量分数，%;
F——每毫升卡尔·费休试剂相当于水的克(卡尔·费休试剂对水的滴定度);
V1——样品萃取液所消耗卡尔·费休试剂的毫升数;
V0——空白所消耗卡尔·费休试剂的毫升数;
m——样品质量，g。
5.说明
①滴定操作过程中，借通人的氮气(也可为二氧化碳气体)保持极小的正压，以驱除空气。
②卡尔·费休法适用于测定乳制品、油脂、巧克力、糖果、脱水蔬菜、香料等样品。含强还原性组分(如维生素C)的样品、不均匀的食品、水分含量高的样品不宜使用该方法。
③冷凝管在使用前需用无水甲醇回流处理。操作：加热回流15min后移开热源，静置15min，让冷凝管内壁附着的液体流下。
