免疫放射分析技术原理

　　免疫放射分析技术原理

　　"将核素标记在抗体上，然后以过量的标记抗体与待测抗原结合，未结合的标记抗体通过和固相的抗原免疫吸附剂结合而去除，溶液中的放射性与待测抗原的含量呈正相关。根据检测过程的操作步骤不同，有以下几种类型

　　1、直接IRMA法

　　将待测抗原与过量的标记抗体进行温育，使二者结合，然后加入固相抗原免疫吸附剂再次温育，吸附游离的标记抗体。离心去除沉淀物，测定上清液中放射性强度，根据标准曲线即可得知待测样品中抗原的含量。

　　2、双抗体夹心IRMA法

　　在待测抗原内依次加入固相抗体和标记抗体，反应后形成固相抗体(Ab1)-抗原-标记抗体(Ab2)复合物，洗涤去除游离的标记抗体，测定固相抗体或载体上免疫复合物的放射性强度，根据标准曲线即可得知待测样品中抗原的含量。此法仅用于检测有多个决定簇的多肽和蛋白质抗原。

　　3、间接IRMA法

　　此法是在上述双抗体夹心法的基础上，进一步改良为用核素标记抗Ab2的抗体(羊抗兔或抗鼠的IgG)，反应后形成固相抗体(Ab1)-抗原 -Ab2-*Ab3(标记抗抗体)的四重免疫复合物。其中，Ab3可作为通用试剂，可省去标记针对不同抗原的特异性抗体。

　　4、BSA-IRMA

　　是将生物素-亲合素系统(BSA)引入免疫放射分析，建立的新一代IRMA。此法最大的优点是使用生物素化抗体和以核素标记亲合素为示踪剂，可以通用于甾体类、前列腺素等小分子物质的检测。由于1个抗体分子上可标记数十个生物素分子，而每个亲合素又可与4个生物素分子结合，从而产生多级放大效应。同时生物素与亲合素之间的亲和力要比抗原抗体间的亲和力大10万-100万倍，二者结合极为稳定，因此，使其灵敏度、特异性和精密度都大大提高。目前一些超灵敏度的 IRMA分析试剂盒就是应用上述原理制成的。