研究者发现了提高CD4+T细胞的抗肿瘤免疫功能的关键

在肿瘤免疫治疗中，激活CD4+T和CD8+T细胞是一项重要的策略。CD4+T细胞不仅能够对肿瘤细胞直接产生毒副作用，还对CD8+T细胞激活和增殖具有辅助作用，帮助产生并保证长时间记忆性CTL应答。而且在无CD8+T细胞的情况下，CD4+T细胞仍具有抑制肿瘤的能力，因此激活CD4+T细胞是肿瘤免疫治疗的关键。最近研究者发现了决定CD4+T细胞激活水平的关键——肿瘤微环境中的cDC2亚群，并在小鼠肿瘤模型上进行了试验。

1、CD4+T细胞对肿瘤的杀伤作用

CD4+T细胞对肿瘤的杀伤作用主要是通过IFN-γ依赖的机制介导的：（1）IFN-γ通过介导产生氧衍生物和NO对肿瘤细胞的细胞毒作用；（2）上调MHC的表达，从而增强肿瘤细胞的识别和清除；（3）改变内源性抗原提呈机制；（4）诱导肿瘤血管生成的抑制。

另有一些研究结果提示：激活的CD4+T细胞可能诱导迟发型超敏反应，吸引炎症细胞，如巨噬细胞、中性粒细胞、嗜酸性粒细胞以及NK细胞到肿瘤细胞附近，如删除CD4+T细胞则导致肿瘤浸润的巨噬细胞缺失，肿瘤不能被保护。该实验表明：CD4+T细胞可以直接激活淋巴结或肿瘤组织中的巨噬细胞。大部分的研究表明CD4+T细胞介导肿瘤抑制是MHC-Ｉ非依赖性的，然而，也有一些证据表明CD4+T细胞能够以MHC限制性的形式识别肿瘤细胞并且裂解它们。

在肿瘤免疫抗体药物和Car-T治疗领域，小鼠肿瘤模型有助于国内外肿瘤免疫抗体药物的研发。对于一个创新药物的研发，需要经过一系列的临床前和临床试验，以证明其“有效”和“安全”，才能被批准上市并进入医生的处方里，在临床前药效模型选择方面小鼠是常用的动物模型。美迪西可以根据客户的需求提供各种有效的动物模型，用来检测药物的有效性。实验动物有非人类灵长动物、狗、小鼠、大鼠、家兔、豚鼠、裸鼠等各种种类。

2、Treg细胞抑制肿瘤免疫应答

肿瘤患者外周血以及肿瘤局部会出现Treg细胞，通过实验证明Treg细胞能够对免疫应答进行抑制，使肿瘤免疫耐受。Treg细胞增多有利于肿瘤的免疫逃逸，它不仅有能力抑制广泛的抗肿瘤免疫反应，同时还可以促进肿瘤微环境血管再生。因此研究人员猜想Treg细胞或许正是阻滞CD4+T细胞激活的元凶。

3、树突细胞DC在免疫应答中扮演抗原呈递作用

树突状细胞(DC)是人体内专门的抗原呈递细胞(APC)，因此可具有抗肿瘤的作用。成熟树突状细胞在某些类型的肿瘤中被发现可指示较好的预后，其处于启动、调控、并维持免疫应答的中心环节，未成熟DC具有较强的迁移能力。经典DC（cDC）有cDC1和cDC2两个亚群，cDC1有着强大的激活CD8阳性细胞毒T细胞的能力。cDC2在面对CD4和CD8阳性T细胞时有着较强的固有抗原呈递能力，且可活化免疫激活性的辅助T细胞Th17。

cDC1和cDC2可迁移至自肿瘤沿淋巴管下游的肿瘤引流淋巴结(tdLN)，以进行肿瘤抗原呈递。在肿瘤相关树突状细胞作为疫苗用于免疫小鼠的实验中，cDC2表现出了明显的肿瘤抑制作用，而cDC1的抗肿瘤效果则不够显著。在被cDC2免疫的小鼠疾病模型中，肿瘤内髓源性抑制细胞(MDSC)的数量显著下降，肿瘤相关巨噬细胞(TAM)的类型从具有促肿瘤生长效果的M2型向抗肿瘤的M1型转变；而在被cDC1免疫的小鼠肿瘤模型体内，肿瘤抗原特异性细胞毒T细胞的比例大大上升。

4、cDC2是CD4+T细胞有效激活的关键

来自加州大学的研究人员对接种B16肿瘤的小鼠淋巴结中的髓系细胞进行了单细胞测序，发现迁移性cDC2亚群可以根据CD301b分子的有无分为两个不同亚群。后续增殖实验则证实了CD301b+/-cDC2亚群引发了初始CD4+T细胞的增殖。也就是说，cDC2是CD4+T细胞有效激活的关键。那是否意味着提高肿瘤微环境中的cDC2的比例，就能有效提高CD4+T细胞的抗肿瘤免疫效果？

实验结果显示，如果仅仅提高cDC2比例，cDC2无法迁移至肿瘤区域，而且激活的CD4+T细胞并没有因此分化增加！抗肿瘤反应也停滞不前。而当研究人员去除了实验小鼠肿瘤模型体内的Treg细胞，发现树突状细胞（DC）的亚群cDC2可顺利迁移至肿瘤区域，同时小鼠的抗肿瘤免疫反应明显加强，而且他们证实这种免疫反应是依赖于CD4+T细胞产生的Treg细胞。

有效的抗肿瘤免疫治疗不仅能够激活CD4+T细胞与肿瘤特异性CTL，还能有效抑制Treg细胞被激活。研究人员指出，去除Treg细胞后可增加cDC2共刺激因子和其它炎症因子的表达，同时促进初始CD4+T细胞激活分子的表达，推动初始CD4+T细胞向Th1样效应T细胞的分化，最终提高其抗肿瘤免疫反应。也就是说，cDC2正是Treg抑制剂的有效靶标，这为肿瘤免疫治疗的发展提供了一个新方向。