两种兔源内毒素结合蛋白的分离、纯化及其体外生物学活性的对比研究

【摘要】　目的　从烧伤合并内毒素血症致多器官损害家兔血清中分离纯化内毒素结合蛋白,并初步对比研究它们的生物学活性。方法　兔血清蛋白质通过二步离子交换层析(Bio2Rex 70 Resin、Mono2Q) 及凝胶过滤分离纯化,并经流式细胞分析实验、绵羊红细胞凝聚实验、氨基末端氨基酸残基测序等方法鉴定,再将所获蛋白质作用于体外培养的人单核细胞(U937) ,观测其分泌TNFα等细胞因子的生物效应。结果　获得两种具有促进内毒素(L PS) 与外周血单核细胞( PBMC) 结合的蛋白质,其中一种相对分子质量为610 ×104 ,其N 端10 个氨基酸序列为TNPGL ITRIT ,证实为兔内毒素结合蛋白(LBP) ;另一种蛋白质相对分子质量为418 ×104 ,其N 端10 个氨基酸序列为GSQGTFTSEE ,与NCBI 蛋白质库中的氨基酸序列进行比较,未发现相同序列,命名为p48 。结论　p48 与LBP 具有相似的生物学功能,p48 的生物学活性稍弱于LBP。提示体内除LBP 外,p48 也
同样起着介导L PS 的毒性作用。这可能是近年国外研究中阻断LBP 的活性后,机体毒性反应并无明显减轻的原因之一。