超氧阴离子自由基清除能力测试试剂盒分光光度计法

超氧阴离子自由基清除能力测试试剂盒

(A002-96T分光光度计法)

一.测定原理

该方法利用NADH-PMS-NBT为超氧阴离子(O₂^·-)生成系统，超氧阴离子清除剂能减少NBT的蓝色。通过检测560nm处吸光值可判断体系中还原物质的还原能力。

二.试剂组成

试剂一：液体40mL×1瓶；

试剂二：液体1mL一瓶；

试剂三：液体1mL一瓶；

试剂四：粉剂一支；

试剂五：1mg/mL没食子酸标准品，1mL。

三.储存条件及有效期

试剂盒-20℃可保存6个月。

四.试剂的配制

试剂一工作液：用时加双蒸水360mL，也就是10倍稀释，得到400mL试剂一工作液；

试剂二工作液：用赠送的棕色瓶配制。试剂二工作液由试剂二加上100mL试剂一工作液配得，现配现用，注意避光；

试剂三工作液：试剂三工作液由试剂三加上100mL试剂一工作液配得，现配现用；

试剂四工作液：粉剂一支。用50mL双蒸水溶解，摇匀后，取10mL，加入90mL试剂一，配成试剂四工作液，现配现用，用赠送的棕色瓶盛装。注意避光，配好的试剂请于2小时内用完。

试剂五：1mg/mL没食子酸标准品，100μL，-20℃保存。

五.操作步骤

充分混匀

充分混匀，室温避光静置5min使之充分反应。560nm处，1cm光径比色杯，采用分光光度计测定吸光值。