食品中着色剂高效液相色谱仪(HPLC)检测方案

　　以食品着色为主要目的的食品添加剂称为着色剂，也称色素。按来源可分为食品合成着色剂和食品天然着色剂两大类。着色剂为使食品着色的物质，可增加对食品的嗜好及刺激食欲。生产企业违禁添加着色剂、甜味剂，长期食用此类产品将严重危害人体健康，质监部门提醒消费者在选购产品时务必认准品牌。

　　赛智科技参考国标(GB/T23877-2009)，利用全新高性能的LC-10Tvp高效液相色谱仪，经实践检验证明可检测食品中违禁添加的着色剂测定，得出的结果准确可靠，检出限好，适用于食品中着色剂的测定，仅供广大用户参考。

　　以下是食品中着色剂的详细检测方法。

　　1仪器与试剂

　　1.1仪器

　　LC-10Tvp高效液相色谱仪

　　Vertex色谱柱C18250mm×4.6mm×5μm

　　实验室常用仪器设备

　　超声波水浴

　　分析天平(感量0.001g)

　　0.45μm水性滤膜

　　1.2试剂

　　甲醇，色谱纯。

　　正己烷。

　　聚酰胺粉(尼龙6)：过200目筛

　　磷酸，色谱纯。

　　柠檬酸溶液：称取20克柠檬酸，加水至100mL，溶解混匀。

　　乙酸铵溶液(0.02mol/L)称取1.54克乙酸铵，加水至1000mL，溶解，经经0.45μm水性滤膜过滤。

　　无水乙醇-氨水-水(7+2+1)：量取无水乙醇70mL、氨水20mL、水10mL混匀。

　　合成着色剂标准液：准确称取按其纯度折算为100%质量的柠檬黄、日落黄、苋菜红、胭脂红、新红、赤藓红、亮蓝、靛蓝各0.100克，置于100mL容量瓶中，加pH=6水到刻度，配成水溶液。

　　2测定原理

　　食品中人工合成着色剂用聚酰胺吸附法或液液分配法提取，制成水溶液，注入高效液相色谱仪，经反相色谱分离。

　　3试样溶液的制备

　　称取试样5.000g-10.000g(精确至0.0001g)，置于100ml烧杯中，加100ml水，用柠檬酸溶液调pH到6，加热至60度，将1 克聚酰胺粉加少许水调成糊状，倒入试样溶液中，搅拌片刻，以G3垂融漏斗抽滤，用pH=4的水洗涤3-5次，然后用甲醇-甲酸混合溶液洗涤3-5次，再用水洗至中性，用乙醇-氨水-水混合溶液解吸3-5次，每次5mL，收集解吸液，加乙酸中和，蒸发至近干，加水溶解，定容至5mL。经0.45μm水性滤膜过滤，进高效液相色谱仪测定。

　　4色谱条件

　　色谱柱：Vertex色谱柱250mm×4.6mm×5μm;

　　流动相：甲醇+0.02mol/L乙酸铵溶液(pH=4);

　　流速：1.0mL/min;

　　温度：室温;

　　进样量：20μL;

　　检测波长：254nm。