长期毒性试验的剂量设计方法之最大耐受量法

在开展临床前毒性试验研究的时候，科学、合理、准确的剂量设计是关键，尤其对于研究周期长、人力财力耗费较多，经不起重复操作的长期毒性试验。重量/体重、重量/体表面积都可以表示药物剂量，为了具有可比性，药物剂量的表示必须统一，即药效学、一般药理学、药动学、急性毒性、长期毒性、其他毒性和临床应用等。最大耐受量法是长期毒性试验剂量设计的一种方法，最大耐受量指的是用大鼠急性毒性的最大无症状剂量。

剂量有高、中、低3个之分，在一个长期毒性试验中，评价剂量设计合理与否的主要依据是：高剂量应使动物产生明显或严重的毒性反应，或个别动物或者少数大鼠死亡。中剂量应使动物产生轻微的或者中等程度的毒性反应。低剂量为安全剂量，应高于预计每天人用量或整体动物最佳有效剂量而动物不出现毒性反应。

最大耐受量（MTD）是指动物能够耐受而不引起动物产生死亡的最高剂量，当某些药物用最大允许浓度和最大允许容量给予动物时仍未能测出半数致死量LD50，可以做一次或一日最大耐受量测定，也可反映受试药的毒性情况。在临床前毒性试验的长期毒理实验设计中，对大鼠而言，高、中、低三个剂量可分别使用1 MTD、1/3 MTD、1/10 MTD作为实验剂量；对犬和猴而言，高、中、低三个剂量可分别使用大鼠的1/2 MTD、1/6 MTD、1/20 MTD作为实验剂量，也可参考犬或猴单次给药的MTD。此法对大部分动物有参考价值，但是少数蓄积性大的药物则不合适。

急性毒性试验为全身给药的毒性研究内容之一，是评价单次或24h内多次累积给药后动物表现出的毒性反应。它可以为长期毒性及特殊毒性等研究的剂量选择和指标设计提供参考，为临床试验剂量设置和不良反应监测提供参考依据，为早期判断某药物是否具有研究开发价值提供毒性强度资料。目前美迪西可以开展急性毒性试验、长期毒性试验、局部皮肤刺激性、免疫毒性和毒代动力学等试验，其毒理学研究可按照非GLP或者GLP标准执行。

采用最大耐受量法可以测定药物对动物的急性毒性。如有研究者以一日最大耐受量测定小鼠灌胃仁青常觉的急性毒性实验，然后可根据最大耐受量来进行长期毒性试验的剂量设计。给大鼠灌胃给药3个不同剂量的仁青常觉，低剂量组(0.350g/kg)、中剂量组(0.700g/kg)和高剂量组(1.400g/kg)，连续90天，空白对照组ig蒸馏水，观察大鼠一般状况、体重、摄食量，测定给药90天及停药15天血液生化指标、脏器系数、解剖学及病理组织^[1]。

结果测得小鼠最大耐受量大于30g/kg(此剂量相当于临床成人拟日服剂量的2142倍)，未发现任何不良反应及死亡现象；各剂量组连续给药90天，未发现死亡，动物生长发育良好，外观正常，行为活动无异常，主要脏器系数、血液生化、血象等指标与空白对照组比较均无显著性差异。因此通过实验，未发现明显毒性反应，证明临床剂量是安全的。

由于剂量偏低难于显示毒性，剂量过高，甚至超过毒性试验剂量，其试验结果则无临床意义，如果剂量设计科学、准确、合理，就等于该试验成功了一半。因此剂量设计在临床前毒性试验中是一个重要的环节，可关系到安全性评价的可靠性。

[1] 藏药仁青常觉的毒理学实验研究[J].