浅析细胞微核试验在检测化合物遗传毒性上的作用

在进行药物研发的时候，需要预测化合物的潜在致癌性和可遗传突变，根据微核形成的原理，药物诱发动物微核率的变化可以反映出所检测药物对小鼠的遗传毒性。创建于20世纪80年代的微核试验，目前已经被许多国家和国际组织规定为新药、食品添加剂、农药、化妆品等毒理安全性评价的必做试验，细胞微核试验包含在一些毒理实验服务机构提供的服务中。

细胞在有丝分裂后期染色体进入子细胞形成细胞核时仍然留在细胞质中的染色体片段为微核，其染色与细胞核一致，由于比细胞核小而称为微核。微核的形成是细胞受遗传毒物作用后的一种遗传学终点，以观察细胞中微核的形成来检测遗传毒物，称为微核试验。微核试验可以是以动物或植物为材料，利用细胞生物学方法观察其出现的微核率来表示材料受遗传损伤程度的一种检测遗传毒性的方法。根据《药物遗传毒性研究技术指导原则》规定，遗传毒性试验须进行哺乳动物体内微核试验。微核试验作为遗传毒性的组合实验中必须检测的项目而受到毒理实验服务机构的重视。

苋菜红可以作用一种药物辅料，用于各种剂型药物的着色。有研究者采用骨髓微核试验观察苋菜红对小鼠的毒性反应，为进一步致突变研究提供参考。研究者将试验动物随机分5组，分别为阴性对照组，苋菜红低、中、高3个剂量组和阳性对照组^[1]。每组10只动物，雌雄各5只。连续ig给予不同剂量的苋菜红，观察试验期内小鼠的一般毒性症状、体质量增长情况和骨髓细胞微核率的改变。研究结果发现苋菜红对小鼠骨髓细胞无明显致突变作用。

毒理实验服务机构可以通过动物实验，阐明某一化合物的毒性及其潜在危害，以便为人类使用这些化合物的安全性作出评价。在中国CRO公司排名中靠前的美迪西在药物安全性评价方面有专业的团队和实战经验，可提供高质量的数据和快速的周转期以支持各项药物安全评价研究。毒理学研究可按照非GLP或者GLP标准执行。

也有研究者采用小鼠骨髓细胞微核试验，对脱氢乙酸进行体内致突变安全性评价^[2]。脱氢乙酸是一种广谱防腐剂，主要是抗酵母菌和霉菌，可以作为防腐剂而用于医药、化妆品及食品方面。现在有不少研究者提出脱氢乙酸对动物机体有较大的毒副作用，人体长期服用会引起肾结石、肝脏和中枢神经系统的损伤，还可能会引起体重的减少和慢性肺水肿。采用细胞微核试验来判断脱氢乙酸是否具有致突变作用，为该化合物的应用提供参考资料。

研究者按照1/10 LD50、1/5 LD50和1/2 LD50设置三个剂量组，另设置阴性对照组和环磷酰胺(CP)阳性对照组(100 mg•kg^-1)。每组10只小鼠，雌雄各半，灌胃给药，两次攻毒时间间隔24 h。在第二次灌胃后6 h，处死小鼠，制片，观察并计数嗜多染红细胞的微核率，并与阳性对照组和隐形对照组进行比较分析。结果发现脱氢乙酸小鼠骨髓细胞微核试验结果为阴性。

目前微核试验在检测化合物的遗传毒性上的应用已经较为普遍。传统的微核试验方法采用的对象为实验动物，主要是大鼠和小鼠，此方法用于药品检验分为单次染毒和重复染毒两种。近年来新的检测手段不断发展，微核的检验方法也不断取得突破，目前以流式细胞仪为检测手段的自动化和体外方法可替代传统的微核试验方法。随着科学技术的进步，微核试验的应用也会更加广泛。

[1] 苋菜红小鼠骨髓微核试验[J].

[2] 脱氢乙酸小鼠骨髓细胞微核试验[J].