细胞增殖实验中可以使用的染料有哪些

细胞增殖是细胞基本的生理活动之一，细胞增殖生长力是判定细胞活力的重要指标。细胞实验服务可以通过判定生长因子、癌基因产物、激素等对细胞的增殖或抑制细胞增殖的影响，用于抗肿瘤药物的筛选。染色是判断细胞是否是活细胞的常见方法，在细胞存活相关染料的选择上，包括结晶紫、MTT、MTS、CCK-8等。

1、结晶紫

结晶紫是碱性染料，能溶于水（溶解度9%）和酒精（溶解度8.75%）。结晶紫在细胞学、组织学和细菌学等方面应用极广，是一种优良的染色剂。它在细胞核染色中常用来显示染色体的中心体，并可染淀粉、纤维蛋白、神经胶质等。在细胞实验服务中，采用结晶紫染色测定法的原理是结晶紫染色可以通过细胞的特定摄生法而选择性地被细胞核吸收，死亡的细胞几乎不吸收结晶紫染料，而被核（DNA）吸收的结晶紫又可以为有机溶媒提取，通过测定提取液的光密度值，就可以测定活细胞的数量，因此可以适用于抗肿瘤药物的筛选，

如有研究者研究葫芦素B(cucurbitacinB，CuB)对骨肉瘤143B细胞增殖、凋亡和侵袭的影响，并探讨其可能的作用机制^[1]。采用不同浓度的CuB处理143B细胞，结晶紫染色和克隆形成实验检测细胞的增殖能力；Transwell小室法检测细胞的侵袭能力；FCM法检测细胞周期及凋亡率的变化等等。结果发现CuB能抑制骨肉瘤143B细胞的增殖和侵袭，并促进其凋亡；这一作用可能与CuB抑制143B细胞中Akt信号通路的活性及上皮-间质转化的发生有关。

然而结晶紫染色法只适用于单层培养细胞，后处理过程比较复杂和繁多，其测定细胞活性不能区分药物对细胞生长是抑制还是细胞毒性作用。

2、MTT

MTT简称四唑盐，又名噻唑蓝；MTT产品为淡黄色粉末，易被水溶解和透过细胞膜而进入细胞内。MTT比色法是常用的检测细胞存活和生长的方法之一，在细胞实验服务中常采用MTT比色法测定细胞群体的相对细胞数量，其检测原理为活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性MTT还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲瓒（Formazan）并沉积在细胞中，而死细胞无此功能。美迪西提供细胞实验服务，其在分子生物学、细胞生物学、体外生物学和结构生物学领域有丰富的经验，可以从最初的cDNA文库构建到药物设计，通过蛋白质纯化、结构测定和分析测定，提供一套完整的生物技术服务流程。

3、MTS

MTS为一种新型的MTT类似物，MTS法原理同MTT法，但优于MTT法。MTS在PMs的存在下可被活细胞还原形成水溶性的甲增产物(故MTS需与PMS合用)，因而被用来建立了可检测细胞活力和增殖能力的MTS检测法。在针对个体进行的化疗药物敏感性试验上，已用于多种肿瘤的临床用药指导并取得一定的效果，MTT法即是广泛应用的方法。在此基础上有研究者将一种新的四唑盐类化合物MTS，用于肝癌细胞药物敏感试验，并取得较好效果。

4、CCK-8

CCK-8试剂中含有WST-8，它在电子载体1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓硫酸二甲酯(1-MethoxyPMS)的作用下被细胞中的脱氢酶还原为具有高度水溶性的黄色甲瓒产物。生成的甲瓒物的数量与活细胞的数量成正比。因此可利用这一特性直接进行细胞增殖和毒性分析。CCK-8用于细胞活性检测，比MTT更敏感，对细胞无毒性，而且步骤简单、性能稳定。

在细胞学实验中，通过对细胞进行染色可以用于细胞毒性、细胞活性和细胞增殖的检测，在细胞实验中，可以用来染色的试剂还有很多，在此不一一列举。

[1]葫芦素B抑制骨肉瘤143B细胞的增殖和侵袭并促进其凋亡[J].