如何从唾液中提取DNA/RNA/外泌体？

为什么有人吃东西总是那么“津津有味”，说话总能“津津乐道”？那是因为他们的唾液质量好，产生唾液的能力也好。您有仔细观察过自己舌头上的味蕾是什么样子吗？味蕾就像小触角在舌头上面飘着，如果没有唾液的滋润，舌头是干的，味蕾的功能就会退化，那么你吃什么东西都会是一个味儿：味同嚼蜡。 我们吃东西觉得好吃，靠的是我们的唾液。唾液由口腔腺体分泌产生，具有清洁保护口腔、抗菌、消化等多种功能。随着唾液组学的发展，科学家们发现唾液是一个潜在的巨大生物标志物储存库。唾液样本易于采集、无侵袭性、可避免病毒传播，在流行病学研究中有望成为血液的替代品，具有很高的研究价值。 唾液组学研究对于寻找疾病分子标志物和药物靶标具有重要意义，对于疾病的早期诊疗具有难以估量的前景。唾液DNA、RNA、蛋白质和微生物等生物标志物在口腔疾病、癌症、糖尿病等全身系统性疾病早期诊断和精准医疗中有很大的应用前景。

目前唾液在疾病诊断中的研究与应用尚处于早期探索阶段，相关数据较零散，亟待克服诸多障碍。经过不断完善，建立唾液分子检测平台，规范研究实施及评估标准。如何将我国巨大的患者资源转化为促进临床诊疗技术进步的战略资源，是科学工作者们可以思考的方向。我们可以建立系统的唾液组学知识网络，寻找更加精准的疾病早期筛查的标志物，深入认识口腔及全身健康的关联，为实现口腔与全身疾病的精准医疗提供准确、无痛和便捷的平台，最终将基础研究成果转化为临床检测技术，为推动实现全民口腔健康做出更大的贡献。 如何收集和保存唾液中DNA，RNA和外泌体呢？ 1。唾液DNA收集和保存试剂盒，RU49000 2。唾液RNA收集和保存试剂盒，RU53800 3。唾液外泌体收集和保存试剂盒，65400

一、唾液DNA收集与保存试剂盒（RU49000）的特点和优势：

Norgen的唾液DNA收集和保存试剂盒设计用于简单无创的唾液收集和室温下保存唾液样本中的DNA。 50个唾液DNA收集和保存装置中的每一个都由3个组件组成：（1）唾液收集漏斗和收集管，（2）收集管盖，（3）装在密封的可挤压安瓿瓶中的Norgen唾液DNA防腐剂。

唾液样本是通过向与收集管组装在一起的收集漏斗内吐唾液而收集的。收集所需量的唾液后，将收集漏斗移除，然后添加防腐剂，使之与收集的唾液混合。每个Norgen的采集管均标有唯一的序列号，可用于安全，匿名地跟踪样品。保存在样品中的唾液DNA在室温下可稳定保存5年以上。该试剂盒非常适合收集和保存用于流行病学和人群研究的DNA样本。

1. 非侵入性，用户友好的样本收集方式； 2. 样品收集和保存在一个试剂盒中； 3. 样品无感染性，可以安全地处理和运输； 4. 保存的DNA在环境温度下可稳定保存多年； 5. 与大多数DNA提取方法兼容； 6. 高质量的DNA适用于敏感的下游应用，包括PCR，qPCR，测序，SNP分析，微阵列，RFLP和Southern印迹分析； 7. 运输配件可单独购买。

唾液样本收集过程如下图：

【唾液DNA收集与保存管中DNA稳定性，测试结果】： 室温下保存在Norgen唾液DNA防腐剂中长达75个月的DNA的稳定性。使用唾液DNA收集保存试剂盒收集唾液样本，在室温下保存长达75个月。在1周，3周，1个月，2个月，4个月，6个月，8个月，12个月，20个月，32个月，40个月，52个月和75个月时从0.5 mL唾液中提取唾液DNA，使用唾液DNA提取试剂盒（RU45400）。100 µL纯化的DNA在琼脂糖TAE凝胶上进行电泳。可以看出在室温下唾液DNA保存管中保存75个月后没有DNA降解。在整个75个月的时间内，DNA的大小都保持在24 kb以上。M：Norgen的UlItraRanger 1 Kb DNA Ladder（12100）。

【唾液DNA收集与保存管（RU49000）中DNA质量，测试结果】： 使用Taqman Real-time PCR从室温下储存1周到75个月的唾液样品中检测GAPDH。 Ct值保持一致，表明室温下保存的唾液DNA的质量从1周到75个月没有变化。Real-time PCR图（红色）中Ct值的提高也表明，唾液DNA分离试剂盒（RU45400）提供了改进的唾液DNA分离方法。

二、唾液RNA收集与保存试剂盒（RU53800）的特点：

唾液RNA收集与保存试剂盒（RU53800）与唾液DNA手机保存管不同之处是收集保存的是唾液RNA，而且保存的RNA在室温下可稳定长达2个月。

【唾液RNA收集与保存试剂盒（货号RU53800）中RNA稳定性，测试结果】： 室温下稳定性长达2个月。使用唾液RNA收集保存试剂盒收集唾液样本，唾液RNA在室温下可保存2个月。在第0天、4天、6天、16天、1月和2个月时使用Norgen的Total RNA提取试剂盒（17200）在0.25 mL唾液样品中的分离唾液RNA。将50 µL洗脱液中的7.5 µL与RNA loading dye混合，并在1x MOPS琼脂糖凝胶上电泳。发现唾液样品在室温下在Norgen唾液RNA防腐剂中保存2个月后，RNA完整性良好。

【唾液RNA收集与保存试剂盒（RU53800）中RNA质量，测试结果】： 三个管家基因在两个月内的稳定性。使用唾液RNA防腐剂从室温下保存的唾液样本中进行监测GAPDH，人18S rRNA和β肌动蛋白基因。在第0天，第4天，第6天，第10天，第16天，第30天和第60天从250 uL保存的样品中分离RNA。使用CFX96 TouchTM Real-Time PCR检测系统（Bio-Rad）进行实时PCR反应（SYBR Green l）。所有基因均在两个月内得以稳定保存。