人淋巴因子激活的杀伤细胞抗生素肽的分离纯化

【内容摘要】　目的　分离纯化人淋巴因子激活的杀伤细胞( lymphok ine act ivated k iller, LA K) 内源性抗生素肽。方法　采用密度梯度离心法分离人外周血单核细胞, 并用IL 22 和PHA 刺激培养。5% 乙酸匀浆细胞获得其酸溶性提取物。应用制备性酸性尿素聚丙烯酰胺凝胶电泳技术和反相高效液相色谱技术分离纯化多肽, T ricine2SDS2PA GE 鉴定其分子量, 并运用琼脂糖弥散法鉴定其抗菌活性。结果　从人LA K 细胞酸溶性提取物中纯化出多个多肽, 其中HL P22b、HL P23a 完全纯化, 分子量分别为7. 9×103 u 和4×103 u。HL P22a、HL P22c、HL P23b 和HL P23c基本纯化, 主带分子量分别为7. 2×103 u、10. 4×103 u、6. 4×103 u、6. 4×103 u。HL P23a 具有抗金黄色葡萄球菌活性,HL P22a、HL P22b、HL P22c、HL P23b、HL P23c 具有抗金黄色葡萄球菌活性和抗白色念珠菌活性。结论　人LA K细胞含多种内源性抗生素肽分子。