嗜热毛壳菌内切β-葡聚糖酶的分离纯化及特性

摘　要:探讨了液体发酵嗜热毛壳菌( Chaetomium thermophile) 产生的内切β2葡聚糖酶的分离纯化及特性。粗酶液经硫酸铵分级沉淀、DEAE2Sepharose Fast Flow阴离子层析、Pheny12Sepha2rose 疏水层析、Sephacry1 S2100 分子筛层析等步骤便可获得凝胶电泳均一的内切β2葡聚糖酶。经1215 %SDS2PAGE 和凝胶过滤层析法分别测得所分离纯化酶蛋白的分子量约为6718kD 和6918kD。该酶反应的最适温度和pH分别为60 ℃和410～415 在pH510 条件下,该酶在60 ℃下稳定;70 ℃保温1h 后,仍保留30 %的活性;在80 ℃的半衰期为25min。金属离子对内切β2葡聚糖酶的活性影响较大,其中Na + 对酶有激活作用;Fe2 + 、Ag+ 、Cu2 + 、Ba2 + 、Zn2 + 等对酶有抑制作用。该酶对结晶纤维素没有水解能力。