浅析生物样本分析的三大验证方法

在进行生物医药研究时，生物样本具有取样少、药物浓度低、内源性物质及个体差异等特点，这些因素可能会影响生物样本的测定，因此需要建立合适的生物样本分析方法。这些生物分析方法验证和试验样品分析应该符合GLP原则，因此GLP生物分析至关重要。在分析方法建立之后，还要进行方法验证，验证的目的是为了保证分析方法适用于相关的样品分析。

生物样本分析的方法学验证主要分为全面验证、部分验证和交叉验证三种，今天我们来简单了解一下这三种验证方法。

1、全面验证

大分子生物药物由细胞培养而得，效价和免疫反应性批间差异很大，多数情况下没有真正意义上的“纯”大分子药物对照品。这就要求制备标准样品、质控样品的对照品与临床前和临床给药的对照品为同一批次。变换批次时，对照品使用前要进行分析鉴别以及生物分析评价来确证分析方法没有改变。对于一个本质上为新药的分析方法，以及对首次建立的分析方法需要进行全面的分析方法的验证，对在分析方法中加入代谢物进行定量分析的时候也要考虑进行全面分析方法的验证。

生物分析方法的建立和验证对于获得可信实验结果至关重要。在进行GLP生物分析时，参加GLP条件下生物样本分析的人员包括操作者和核对者，必须经过GLP法规及相关技能的培训并考核通过。试验前需要了解相关准则与法规，使用的诸如质谱、液相，电子天平、精密移液器等分析仪器还必须在验证或强检有效期内等等。美迪西生物分析服务部门拥有专业的科研团队，分析实验室配置先进的仪器设备，实行全面的信息化管理，实验研究符合FDA/CFDA GLP标准要求，可以为客户提供小分子药物、生物制剂、疫苗和生物标记物的筛选与开发，以及临床前和临床研究。

2、部分验证。

方法学验证是整个试验数据可靠的基本保证，因此其是各个实验室标准操作规程(SOP) 的重点内容。已经过验证的分析方法变更时可考虑做部分分析方法的验证，如生物样本分析方法在实验室间的转移、定量浓度范围改变、生物介质改变、稀少生物介质、证实复方给药后分析方法的特异性。这时候应报告所有的改变，并对重新验证或部分验证的范围说明理由。

3、交叉验证

比较两个分析方法的验证参数。常用于同一物质的不同分析方法的改变，如从液质联用到ELISA的变化，或者两个或两个以上实验室对同一物质按照同一方案进行分析时。同一实验室采用不同分析方法或不同实验室采用相同分析方法获得的数据，需要比较数据且对分析方法要进行交叉验证。尽可能在研究样品分析前开展交叉验证，需采用两种分析方法分析相同的质控样品或真正样品。对质控样品而言，两种分析方法准确度应在15%以内；对研究样品而言，至少67%样品准确度应在20%以内。

建立可靠的和可重现的定量分析方法是进行生物医药研究的关键之一，为了保证分析方法可靠，必须进行方法验证。生物样品分析方法的建立、验证和应用是临床前药动学和Ⅰ期临床试验研究中的重要组成部分，关系到后续研究的科学性和正确性，而且在分析方法建立阶段就要开始考察，前期验证阶段的确证，和监测样品分析阶段。