用三嗪染料配基吐温80-磷酸盐液固萃取2体系分离纯化乳酸脱氢酶

摘　要　目的　利用三嗪类染料Cibacron B lue F3G2A 修饰的吐温80, 与磷酸钾盐构建染料配基吐温802盐液2固亲和萃取体系, 从猪心肌匀浆液中分离纯化乳酸脱氢酶。方法　成相染料配基吐温80 浓度为15% (其中吐温80 中含染料配基吐温80 为10% ) ; 成相磷酸钾盐浓度为1. 49 mo löL (pH 8. 50) ; 匀浆液加入量为体系的1% , 一次成相正萃取。将吐温80 相保温溶解, 改变磷酸钾盐浓度为0. 91mo löL , 二次成相反萃取。结果　一次成相正萃取吐温80 相平均酶活收得率97% , 纯化8. 0 倍。二次成相反萃取, 盐水相酶活收得率近100% , 实现了酶与吐温80 相的分离。结论　三嗪染料配基吐温802磷酸盐液2固萃取体系, 分离纯化乳酸脱氢酶, 具有良好选择性和分离纯化效果。对其进一步研究与开发, 具有较大实际应用价值。