重组人胰岛素样生长因子21 分离纯化工艺的建立

摘要:目的　建立重组人胰岛素样生长因子21 (rhIGF21) 大肠杆菌表达后的高效分离纯化工艺,以便获得高纯度的重组蛋白。方法　已构建好的表达载体转化大肠杆菌BL21 ,经IPTG诱导进行表达。将离心收集到的菌体用超声破壁,破壁菌液离心分离,收集上清液,进行阴离子交换层析、疏水层析和分子筛纯化,得到最终纯品。蛋白纯度用SDS2PAGE 鉴定, EL ISA 法检测rhIGF21 含量,检测纯化后重组蛋白的生物学活性。结果　用大肠杆菌BL21 表达rhIGF21 以可溶性形式存在胞浆中,经3 步柱层析纯化后,可获得高纯度的rhIGF21 (纯度> 98 %) 。该蛋白在体外具有良好的促NIH3 T3 细胞增殖作用。结论　建立了rhIGF21 分离纯化工艺,其工艺流程可获得具有生物学活性的高纯度rhIGF21 ,为产业化及临床应用奠定基础。