Elisa试剂盒检测原理

Elisa生物检测是一种敏感度高，同时特异性强，重复性好的实验检测方法，由于其试剂稳定、易保存，操作简便，结果判断较客观等因素，已广泛应用在免疫学检验的各领域中。

目前市面上的Elisa试剂盒检测原理主要有以下四种：直接法，间接法，夹心法，竞争法。

  四种Elisa检测方法由于其检测原理各有优劣：

通常我们在选择所需要的Elisa试剂盒时主要会从以下几个方面进行选择：

Elisa试剂盒选择原则：

Elisa试剂盒质量到底怎样？检测结果的可信度高不高？

Elisa试剂盒评价标准：

      ① 准确性：标准品线性回归与预期浓度相关系数R值，应大于等于0.9900。

      ② 灵敏度：反应试剂盒的最低检测浓度

      ③ 特异性：不与其它可溶性结构类似物交叉反应。

      ④ 重复性：板内、板间变异系数

      ⑤ 回收率：判断实验的准确性和特异性

Elisa试剂盒的标准曲线：

标曲R值是几个9才合格？

实验室应按检测标准（方法）的要求使用标准溶液或标准物质建立标准曲线。所用标准溶液或标准物质应覆盖被测样品的浓度范围。检测标准（方法）如无具体的要求，至少使用5个标样（除空白外）建立线性标准曲线，每个点重复测定1-3次，对于筛选方法，线性回归方程的相关系数不应低于0.98，对于确证方法，相关系数不应低于0.99。

其实，大于0.99是判断是否为线性相关的一个标准，实际应用中线性大于0.999才是比较理想的。线性在0.99到0.999之间的监测结果只用接近最高浓度一半（中间浓度）的位置才比较准确，如果线性大于0.999的话，在整个线性范围内都会有一个比较满意的结果。

如果检测的线性不好，可以减少标准的覆盖范围，将标准的浓度调整到待测样品浓度附近，这样结果也是非常准确的。例如，样品的浓度约20ppb,但在0~50ppb范围建立标准曲线，但线性非常不理想，这时可以将标准范围调整到15~25ppb之间，作五个标准。

可以检测检测各类食品，饲料，组织及生物液体中真菌毒素、抗生素、食品添加剂以及其他细菌蛋白的ELISA试剂盒：

1.抗生素类：氨苄青霉素，E4350，样本：血清，尿液，牛奶，组织

检测食品中抗生素的残留

样本类型：组织、血清、牛奶、鸡蛋和其他生物样本

真菌毒素是真菌产生的低分子量次级代谢产物2.真菌毒素：总黄曲霉毒素，E4747，样本：酒、酱油、醋、谷物、花生、
配方饲料、食用油

样品类型：玉米、谷物、花生、大米、大豆等。

食品受到生物和环境污染物的污染发生在生产和加工的几个阶段3.食品添加剂： 沙丁胺醇，K4209，样本：猪尿、组织、饲料

样品类型：牛奶、肉类、玉米、谷物、花生、大米、大豆，等。

表达蛋白经过几个纯化步骤后，宿主细胞蛋白仍然可以以较高浓度存在，甚至会与原料药一起纯化和浓缩；样品类型：细胞裂解液、其他生物液

4.宿主细胞蛋白：CHO 宿主细胞蛋白，E4537，样本：细胞裂解液，其他生物液体

5.其他毒素：双酚A（BPA），E4722，样本：细胞裂解液，其他生物液体

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