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旭月(北京)科技有限公司(http://xuyue.net),是2005年创立于中关村科技园区的国家高新技术企业。创始人许越先生,曾服务于美国航空航天局NASA,是现代“非损伤微测技术(NMT)”奠基人,动态分离子组学(imOmics)创始人,NMT产业化倡导者,美国扬格公司(http://youngerusa.com)现任总裁。
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Food Energy Secur农科院作物所:NMT发现E3泛素连接酶基因TaPUB15增强了水稻在盐胁迫下排钠保钾的能力
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下一篇 2021-01-28 14:47:37
NMT作为生命科学底层核心技术,是建立活体创新科研平台的必备技术。2005年~2020年,NMT已扎根中国15年。2020年,中国NMT销往瑞士苏黎世大学,正式打开欧洲市场。
基本信息
主题:NMT发现E3泛素连接酶基因TaPUB15增强了水稻在盐胁迫下排钠保钾的能力
期刊:Food and Energy Security
影响因子:5.242
研究使用平台:NMT植物耐盐创新平台
标题:TaPUB15, a U-Box E3 ubiquitin ligase gene from wheat, enhances salt tolerance in rice
作者:中国农业科学院作物研究所景蕊莲、毛新国、李巧茹
检测离子/分子指标
Na+、K+
检测样品
2周龄水稻幼苗(转基因、WT)根分生区(距根尖100 μm根表上的点)
植物U-box(PUB)E3泛素连接酶在对环境胁迫和激素信号的响应中起着至关重要的作用,但在小麦(Triticum aestivum L.)中对其了解甚少。我们鉴定了一个U-box E3泛素连接酶基因TaPUB15,它在小麦栽培品种中是保守的。TaPUB15在多种组织中表达,且根部的表达量远高于其他组织。盐、脱落酸、4℃和聚乙二醇(PEG)诱导TaPUB15的转录。TaPUB15-D的过表达使转基因水稻的耐盐性得到改善,同时转基因水稻的根也增多。离子通量测定表明,转基因水稻植株的耐盐性得到改善,在盐度胁迫下保持较低的Na+/K+比值。基因表达测定表明,相对于野生型,转基因水稻中一些盐胁相关基因显著上调。转基因水稻的这些结果也在转基因拟南芥中得到了验证。我们的数据表明,TaPUB15在提高作物植物的耐盐性方面起着至关重要的作用,是未来促进耐盐小麦育种的宝贵基因资源。
离子/分子流实验处理
100 mM NaCl处理1 h
为了更好地了解Na+和K+的动态变化,使用非损伤微测技术(NMT)来监测转基因和WT水稻根尖的Na+和K+流速。100 mM NaCl处理1 h后,所有测试的幼苗均显示出Na+外排。Na+在转基因水稻中的外排速率远高于WT(图1a)。同时,转基因水稻幼苗显示出K+内流,野生稻幼苗显示出K+外排(图1b)。因此,TaPUB15-D在水稻中的过表达明显增加了在盐胁迫下保K+和排Na+的能力。较低的Na+/K+比值确保转基因植株在高盐度条件下具有更好的耐盐性。
图1. 转基因水稻在盐胁迫下Na+和K+的流速变化情况
其他实验结果
3个TaPUB15同源基因均高度保守。
TaPUB15-D定位在细胞核和细胞质中。
TaPUB15在幼苗根系表达量最高,其次是幼苗叶片、抽穗期根系和萌发期和幼苗期的根基部。在抽穗的节、茎和旗叶中表达量最低。
在250 mM NaCl、50 μM ABA和4°C低温处理下,TaPUB15被强烈激活,但在16.1% PEG处理下TaPUB15被激活程度较低。
TaPUB15-D过表达导致转基因水稻的根更长、更多。
TaPUB15-D在水稻中的过表达增强了其耐盐性。
转基因株系中OsP5CS1的转录水平与WT相比增加了近4倍。钾转运基因OsHKT1;1的表达被盐胁迫显著诱导。
TaPUB15-D的过表达减少了Na+的积累,使水稻转基因株系在盐碱条件下保持相对较低的Na+/K+比值。
TaPUB15-D的过表达增强了转基因拟南芥的耐盐性。
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