ELIPA 驱动蛋白ATP酶检测（酶联无机磷酸盐测定）试剂盒方案

驱动蛋白是1985年从鱿鱼的轴质(axonplasm)中分离的一种发动机蛋白。能利用ATP水解所释放的能量驱动自身及所携带的货物分子沿微管运动的一类马达蛋白，与细胞内物质运输有关。

结构及功能：

驱动蛋白是一条长80nm的杆状结构，头部一端有两个成球状的马达结构域，另一端是重链（(kinesin heavy chain，KHC）和轻链(kinesin light chain，KLC）组成的扇形尾端，中间是重链组成的杆状区。球状的头部具有ATP结合部位和微管结合部位。大多数驱动蛋白趋向于微管的正端，在大多数细胞中，这要求将货物（例如蛋白质和膜成分）从细胞中心向外围运输。这种运输方式称为顺行运输。

由于驱动蛋白在在细胞诸多物质运输过程中起着至关重要的作用，对不同状态下驱动蛋白活性检测也有了需求，驱动蛋白通过利用ATP水解的能量沿着微管（MT）上面移动而起作用。一旦驱动蛋白结合到它预定的MT轨道上，ATPase的作用效果通常会提高几百到几千倍。MT激活的驱动蛋白ATPase是其运动功能的主要参数，是监测和研究各种实验条件下驱动蛋白活性的有力方法。

Cytoskeleton的Kinesin ELIPA 驱动蛋白ATP酶检测（酶联无机磷酸盐测定）试剂盒，主要基于在无机磷酸盐（Pi）的存在时，在苯胺中嘌呤核苷磷酸化酶（PNP）将2-氨基-6-巯基-7-甲基嘌呤核糖核苷（MESG）催化为2-氨基-6-巯基-7-甲基嘌呤时在330-360 nm处发生的吸光度变化来反映驱动蛋白活性。一分子无机磷酸盐将在不可逆的反应中生成一分子2-氨基-6-巯基-7-甲基嘌呤。用途如下：

1.动力学测量微管激活的驱动蛋白ATPase的活性

2.驱动蛋白抑制剂的筛选现

3.驱动蛋白抑制剂IC50s的测定

检测结果如下：

微管激活驱动蛋白重链ATP酶活性检测结果：检测了一些驱动蛋白ATP酶活性。ATP水解的Vmax范围从驱动蛋白HC的10,000 nmol ATP / min / mg到染色质激酶的470 nmol ATP / min / mg之间。

文章来源：https://www.amyjet.com/featured/kinesin.shtml