Ssp dnaB蛋白质内含子介导的重组人脑钠素的制备

上一篇 / 下一篇  2008-12-20 20:01:13/ 个人分类：蛋白质

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摘　要　脑钠素(BNP) 是临床治疗代偿失调性心衰竭的有效药物。将脑钠素与组氨酸标签(His-tag) 以及具有自我剪切功能的Ssp dnaB 微型蛋白质内含子进行融合表达。表达产物经Ni-Sepharose 亲和层析及体外复性处理后, 用CM-纤维素对复性产物进行了浓缩, 并通过改变CM-纤维素柱内的pH及温度, 诱导Ssp dnaB 微型蛋白质内含子的剪切作用, 使脑钠素从融合蛋白中释放并与载体蛋白(His-DnaB) 分离, 再经C4 反相高效液相色谱法进一步纯化后, 从每升培养液中获得了218mg 纯度达97 %的重组人脑钠素。体外活性测定结果表明, 重组人脑钠素对兔胸主动脉条具有显著的血管舒张效应, 其EC50 为
1194 ×10 - 6mgPmL。



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TAG: 内含子蛋白质蛋白质剪接多肽制备脑钠素

 

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