痹肿消汤对胶原性关节炎大鼠滑膜双向电泳蛋白质表达的影响

[摘要] 　目的: 分析痹肿消汤( bizhongxiao decoction , BZXD ) 对胶原性关节炎大鼠滑膜双向电泳蛋白质表达谱的影响,为阐明痹肿消汤治疗类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis, RA ) 作用机制提供新线索。方法: 7 0 只SD 大鼠随机分为正常对照组(正常组) 、模型对照组(模型组) 、痹肿消汤治疗组( BZXD组) ,采用皮下注射牛Ⅱ型胶原与完全福氏佐剂制成实验性关节炎( collagen 2induced arthritis, CIA ) 模型。应用双向凝胶电泳技术( two 2dimensional gel electrophoresis, 2 2DE ) 分别分离正常组、模型组、BZXD 组大鼠关节滑膜的总蛋白后,胶体考马斯亮蓝染色, 扫描2 2DE 胶获取电子图像, Pdquest图像分析软件比较分析此3 组双向凝胶电泳图谱并识别差异表达的蛋白质。结果: 成功复制了CIA 大鼠模型; 建立了正常组、模型组和BZXD 组大鼠滑膜的2 2DE图谱,其平均蛋白质点数分别为9 47 ±3 9 , 994 ±41 , 1 0 31 ±5 2 ,其匹配率为92% , 91% , 9 4. 2% ; 模型组的3 块胶在蛋白质点位置上有较好的重复性, 不同胶间蛋白质点在等电聚焦( isoelectric focusing, IEF ) 方向的偏差是( 0. 89 6 ±0. 217 ) mm , 在十二烷基磺酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳( sodiumdo 2decylsufate 2polyacrylamide gel electrophoresis, SDS2PAGE)方向的偏差为( 1. 102 ±0. 104)mm。比较分析模型组和BZXD 组大鼠滑膜的2 2DE图谱,发现此2 组间有3 28 个差异点, BZXD 组有1 74蛋白质点表达上调, 14 7 个蛋白质点表达下调, 7 个蛋白质点只在模型组表达。模型组与正常组之间有19 3 个差异点, 123 个在模型组表达上调, 70 个表达下调。结论: 建立了CIA 大鼠关节滑膜的双向凝胶电泳图谱,识别了3 28 个差异表达的蛋白质,对这些差异蛋白质的鉴定将为痹肿消汤治疗RA 的作用机制提供新的实验依据。