苯并芘最新快速检测方法
苯并[a]芘是一种众所周知的有害有机化合物具有致突变和致癌的特点被环境保护署EPA列为环境优先控制污染物。食用油中苯并[a]芘的浓度极低分析非常困难。国家标准方法GB/T
22509-2008采用氧化铝固相萃取柱净化样品但氧化铝的活性不易控制样品处理过程复杂方法回收率难以得到保证。
本文应用维泰克科技武汉有限公司的HiCapt
Benzo苯并[a]芘专用固相萃取柱开发了食用油中苯并[a]芘的快速检测方法该方法具有以下特点:专利创新的苯并[a]芘专用萃取填料、有效去除食用油中的中性脂肪和维生素等基质干扰、回收率稳定、重现、克服了传统方法中氧化铝活性不稳定的缺陷、方法简单、快速、节省溶剂只需要15mL溶剂、45min即可完成、传统分析大约需要800mL溶剂耗时8小时。是用于苯并[a]芘分析的一种好方法
1. 样品处理
1.1 样品提取参考国标GB/T GB/T 22509-2008
称取0.4g植物油取2mL正己烷溶解涡混1min待净化。
1.2 固相萃取柱净化HiCapt Benzo苯并芘专用柱(500mg/3mL)
1活化在HiCapt Benzo柱中依次加入5mL丙酮2 mL正己烷活化。
2萃取将待净化液加入HiCapt Benzo柱中在柱中正己烷液面为2mm时上样此过程不要使柱
干涸再用200μL正己烷淋洗样品管一并加入SPE柱中。流出液弃去。
3清洗待上样液完全流出后用3mL的乙酸乙酯:正己烷v/v=1:4溶液淋洗淋洗液弃去将小柱抽干。
4解吸3mL丙酮解吸收集解吸液。
5吹干及定容解吸液50℃氮气吹干加入异丙醇200μL溶解并定容待分析。
2.色谱条件
色谱柱HiSep C18-T (150 mm×4.6 mm i.d.5 μm)
流动相乙腈/水溶液(88:12v/ v)流速1 mL/min
荧光检测器激发波长384nm 发射波长406nm
柱温40℃进样量10 μL。
3. 苯并[a]芘标准溶液液的配制
储备溶液的配制
标准储备液1称取苯并[a]芘5mg用乙腈定容至10mL, 配制成500mg/L的标准储备液供HPLC分析
标准储备液2称取苯并[a]芘5mg用正己烷定容至10mL配制成500mg/L的标准储备液供SPE试验
将上述储备液密封后放置于4℃冰箱中避光保存至少6个月内稳定。
工作溶液的配制
取苯并[a]芘标准储备液1用乙腈稀释, 供HPLC分析取苯并[a]芘标准储备液2用正己烷稀释供SPE试验。
标准曲线将500mg/L的苯并[a]芘标准储备液1用乙腈稀释配制0.5、1.0、20、40μg/L的溶液绘制标准曲线。
4 结果
4.1 标准曲线与检出限
取0.51.020.040.0μg/L
4个浓度的系列标准溶液进样分析以样品浓度为Y轴、峰面积为X轴进行线性回归所得标准曲线如图1。线性范围为0.5~40μg/L,相关系数为0.99999。检出限以3倍信噪比计算本方法苯并[a]芘的检出限为0.03ug/kg。
4.2 回收率和精密度
分别加入低、中、高3种质量浓度的苯并[a]芘标准溶液于食用油样品中然后按照本实验方法进行测定回收率为92.8~98.5%见表1。图2为添加苯并[a]芘的食用油样品的色谱图。从该图可以看出没有杂质干扰且该方法具有较好的日内及日间精密度见表1其标准偏差分别小于5.55%和4.71%。
结果表明本实验方法对植物油中苯并[a]芘提取具有良好的回收率杂质去除效果好方法重复性好。详细内容见附件。