表皮生长因子受体调控的人鼻咽癌细胞系CNE2 分泌蛋白质的筛选

摘要为筛选表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor，EGFR) 调控的鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma，NPC) 细胞的分泌蛋白质，揭示EGFR 在NPC 发病中的作用机制，采用无血清培养法培养NPC 细胞系CNE2，并用转化生长因子(transforming growth factor-α，TGF-α) 刺激CNE2 细胞24 h 作为实验组，对照组CNE2 细胞不用TGF-α刺激. 超滤法脱盐并浓缩两组细胞的培养上清制备分泌蛋白，采用双向凝胶电泳技术(two-dimensional electrophoresis，2-DE) 分离两组细胞的分泌蛋白，PDquest 图像分析软件识别差异表达的蛋白质点，基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix-assisted laserdesorption/ionization time of flight massspectrometry，MALDI-TOF-MS) 鉴定差异表达蛋白. 建立了实验组和对照组CNE2 细胞分泌蛋白的2-DE 图谱，图像分析识别了22 个差异蛋白质点，质谱鉴定了8 个非冗余蛋白质，其功能涉及肿瘤细胞侵袭转移、细胞凋亡和增殖，为进一步揭示EGFR 在NPC 发病中的作用及其机制奠定了基础.