低叶绿素b 水稻突变体类囊体膜的比较蛋白质组学

摘要 采用蓝绿温和胶凝胶电泳(blue-native polyacrylamide gel-electrophoresis, BN-PAGE), 以及改进的第二向SDS-PAGE分离了水稻低叶绿素b 突变体ZH249-Y 和野生型ZH249-W 类囊体膜蛋白复合物, 系统比较了突变体和野生型各复合物亚基的表达差异. 结果显示, 第一向BN-PAGE 分离了PSⅠ-LHCⅠ、LHCⅠ缺失的PSⅠ、ATP 合成酶、细胞色素b6f、CP43 缺失的PSⅡ及LHCⅡ六种复合物. 上述各复合物经第二相SDS-Urea-PAGE 分离后, 利用胶内酶解, 高效液相层析分离肽段,电喷雾串联质谱鉴定了复合物的亚基. 结合免疫印迹研究, 证明和野生型相比, 突变体光系统Ⅱ捕光天线复合体的表达量适度下降, 但光系统Ⅰ捕光天线破坏严重, 同时光系统Ⅱ核心蛋白和ATP 合成酶的表达量上升. 研究结果对揭示低叶绿素b 水稻突变体较高光化学效率和光稳定性的分子基础提供了线索, 同时也表明, 改进的BN/SDS-PAGE 双向电泳不仅可以有效地分离膜蛋白复合物及亚基, 也可以进行不同生理条件下, 或野生型和突变体之间膜蛋白质组的比较研究.