液相色谱常见问题及处理方法（简易版）1

一、峰拖尾

峰拖尾的原因有很多，我们首先从最简单最容易操作的开始排查。

可能原因一：系统的死体积过大。这点特别容易发生在新手使用时，没注意管路接头的正确连接。

解决方法：将HPLC系统的管路接头按流动相的走向检查一遍，按正确的连接方法连接好，尤其注意连接进样阀和柱子的部分。正确的连接方法：管路先伸出接头一段，长一点没关系，连接的时候注意将伸出的管路插到底部（一定要插到底），然后再慢慢的把接头往前推拧紧。需要注意的是，7725i进样阀的密封嘴锥度和普通的不太一样，连接阀的尽量用阀原装的密封嘴。

可能原因二：色谱柱未平衡好。在使用含有缓冲盐或者表面活性剂的流动相时，色谱柱的平衡时间往往很长，往往就会出现心急不想等时间的时候，这个时候进样出来的结果就可能出现峰拖尾等峰型异常的现象。

解决方法：耐心等待。另外，对于比较难平衡的体系，时间1h以上的，建议改用正常流速的一半平衡色谱柱，这样平衡时间也不会增加，还节约了流动相。

可能原因三：色谱柱污染。

解决方法：首先按色谱柱的出厂条件用标准样品测试柱效，如果依然拖尾，说明色谱柱污染，按照说明书条件进行清洗或更换新的色谱柱。如果用到预柱的话，先试试更换或清洗预柱。

可能原因四：流动相问题。使用了不恰当的流动相条件也会出现峰拖尾现象。

解决方法：更改流动相条件。