Nanoprobes 艾美捷用于免疫组织化学和印迹的EnzMetTM

虽然EnzMetTM不只是用于原位杂交的光学检测。它对生物芯片上的DNA电检测也非常有效，在这里，它比银增强的胶体金提供了改进，可以使用电J阵列对目标DNA进行电检测。现在，在他们最近发表在《生物传感器和生物电子学》上的论文中，Schüler、Fritzsche和合作者证明了这一过程可以用在丝网印刷的电J结构上，用于基于芯片的病毒DNA（人类CMV DNA的150bp PCR产物）的电检测。这些电J阵列是在玻璃基底上生产的，使得额外的光学读数成为可能。丝网印刷的结构显示了所需的精度，并与应用的生化协议兼容。当与通过标准光刻技术生产的芯片基底相比，丝网印刷的芯片显示出同样的灵敏度和特异性。因此，用于电学检测的DNA芯片电J阵列的丝网印刷为生产具有微结构电J的DNA芯片提供了一种有趣的和具有成本效益的方法。

如果你想亲自尝试这种应用，Nanoprobes 艾美捷 EnzMetTM HRP检测试剂盒可用于研究应用。

Nanoprobes艾美捷 EnzMetTM HRP检测试剂盒参考文献：

Schüler T, Asmus T, Fritzsche W, Möller R.: 丝网印刷是检测病毒DNA的带电读数的DNA芯片的成本效率制造方法。Biosens. Bioelectr., 24, 2077-2084 (2009).

摘要（由Science Direct提供）。

EnzMetTM也是免疫组化（IHC）的理想检测和可视化方法，它可用于高度敏感的检测，背景最小，在印迹上的对比度非常高。使用高复杂度组织微阵列（TMA）测试了免疫组化的应用。使用自动玻片染色系统（Ventana Medical Systems），通过酶金属学（EnzMet）对88种常见的实体瘤进行了评估；选择目标是为了评估EnzMet在TMAs中特异性定位核（雌激素受体）、细胞质（细胞角蛋白）和细胞质膜（HER2）的编码抗原的能力。对于乳腺肿瘤以及肾脏、结肠和前列腺的癌肿，所评估的所有三种抗原的染色强度是相当的。然而，与DAB相比，EnzMet IHC制备的染色质量更清晰，染色沉积物更明确，显示出更多的点状外观。EnzMet和传统IHC的结果完全一致。EnzMet反应产物密集而清晰，没有明显的扩散，并为评估的核、细胞质和细胞膜定位抗原在石蜡切片中提供了出色的高分辨率的细胞区段区分。酶金相术中沉积的元素银密度较高，允许在相对较低的放大率下评估核心免疫表型，不需要浸油，可以有效地筛选更多的组织。此外，信号是稳定的，可以提供永久的记录。

参考文献。

Tubbs R.; Pettay J.; Powell R.; Hicks D. G.; Roche P.; Powell W.; Grogan T., and Hainfeld, J. F.: 通过酶金属学对组织微阵列中的亚细胞区进行高分辨率的免疫分型。Appl. Immunohistochem. Mol. Morphol., 13, 371-375 (2005).

摘要（由PubMed（Medline）提供）。

对于免疫组化，使用Nanoprobes EnzMet EnzMet HRP Detection Kit for IHC/ISH（目录号6001）。

左图：石蜡包埋的人膀胱肿瘤中上皮细胞角蛋白的免疫过氧化物酶染色。

(a)用DAB进行二次免疫过氧化；(b)用EnzMetTM进行二次免疫过氧化方法（原始放大倍数为400）。

右图。使用（c）DAB和（d）EnzMetTM开发的HRP结合物对his标记的融合蛋白进行Western blot检测的比较。

转移后，将膜与抗His-Tag（6xHis）单克隆抗体孵化，然后用BSA阻断，然后暴露于辣根过氧化物酶（HRP）结合的第二抗体。然后通过DAB检测（面板A）或EnzMetTM检测（面板B）对His标记的融合蛋白进行可视化。泳道1和4：0.1 µg的34 kDa his-tagged ATF-1。泳道2和5：0.1 µg 68 kDa his-tagged YY1。泳道3和6：0.1微克BSA和0.1微克卵清蛋白。

在大多数情况下，使用Nanoprobes EnzMetTM印迹方案可以替代传统的DAB显影，而无需进一步修改方案。然而，由于其更高的灵敏度，为了达到灵敏度和清晰度的J佳组合，可能需要更大的一级抗体或二级探针稀释度。在免疫组织化学实验中，五倍到十倍的额外稀释已经被发现可以获得良好的结果，在这里也可能是合适的。

Nanoprobes 艾美捷 EnzMetTM印迹方案参考文献：

Liu, W.; Mitra, D.; Powell, R.; Tubbs, R.; Pettay, J., and Hainfeld, J.: Enzyme Metallography Silver Deposition for HRP Detection. Presented at ASCB 2007, Washington DC, December 1-4, 2007,: Poster # B349, Presentation # 1209.

Nanoprobes特色荧光纳米金探针在一个探针中结合了纳米金（Nanogold）和荧光素，用于荧光和电镜两种技术共同进行样品成像。艾美捷科技是Nanoprobes的中国代理商，为科研工作者提供优质的产品与服务。

来源：https://www.amyjet.com/merchants/Nanoprobes-n.html