常用的电泳缓冲液
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下一篇 2013-02-19 21:36:57
缓冲液 |
使用液 |
浓贮存液（每升） |
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tris-乙酸（tae） |
1×：0.04mol/l tris-乙酸 |
50×：242g tris碱 |
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0.001mol/l edta |
57.1ml冰乙酸 |
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100ml 0.5mol/l edta(ph8.0) |
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tris-磷酸（tpe） |
1×:0.09mol/l tris-磷酸 |
10×:10g tris碱 |
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0.002mol/l edta |
15.5ml85%磷酸（1.679g/ml） |
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40ml 0.5mol/l edta(ph8.0) |
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tris-硼酸（tbe）a |
0.5×0.045mol/l tris-硼酸 |
5×：54g tris碱 |
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0.001mol/l edta |
27.5硼酸 |
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20ml 0.5mol/l edta(ph8.0) |
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碱性缓冲液b |
1×:50mmol/l naoh |
1×:5ml 10mol/l naoh |
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1mmol/l edta |
2ml 0.5mmol/l edta(ph8.0) |
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tris-甘氨酸c |
1×:25mmol/l tris |
5×:15.1g tris |
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250mmol/l 甘氨酸 |
94g 苷氨酸（电泳级）（ph8.3） |
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0.1% sds |
50ml 10% sds(电泳级) |
说明：
①tbe溶液长时间存放后会形成沉淀物，为避免这一问题，可在室温下用玻璃瓶保存5×溶液，出现沉淀后则予以废弃。
以片都以1×tbe作为使用液（即1：5稀释浓贮液）进行琼脂糖凝胶电泳。但0.5×的使用液已具备足够的缓冲容量。目前几乎所有的琼脂糖胶电泳都以1：10稀释的贮存液作为使用液。
进行聚丙烯酰胺凝胶垂直槽的缓冲液槽较小， 故通过缓冲液的电流量通常较大，需要使用1×tbe以提供足够的缓冲容量。
②碱性电泳缓冲液应现用现配。
③tris-甘氨酸缓冲液用sds聚丙烯酰胺凝胶电泳。
2×sds凝胶加样缓冲液：
100mmol/l tris·hcl(6.8)
200mmol/l二硫苏糖醇（dtt）
4%sds（电泳级）
0.2%溴酚蓝
20%甘油
不含dtt的2×sds凝胶加样缓冲液可保存于室温，应在临用前取1mol/l贮存液现加于上述缓冲液中。
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