艾美捷MTT细胞增殖检测试剂盒结果示例&引用文献

上一篇 / 下一篇  2022-11-30 15:38:29/ 个人分类:生化试剂

艾美捷MTT细胞增殖检测试剂盒测定原理:

该试剂盒提供了比色形式测量和监测细胞增殖含有足够的试剂用于评估在96孔板中进行960次测定或在24孔板中进行192次测定。细胞可以被镀,然后用影响增殖的化合物或药剂。然后用增殖试剂检测细胞,在活细胞中由黄色四唑MTT转化为紫色福尔马赞形式细胞还原酶。细胞增殖的增加伴随着信号的增加,虽然细胞增殖(和信号)的减少可以表明化合物的毒性作用或次优的培养条件。该测定原理是基本的,可应用于大多数真核生物细胞系,包括贴壁和非贴壁细胞以及某些组织。这种细胞增殖试剂可用于检测细菌,酵母,真菌,原生动物以及培养的哺乳动物中的增殖和鱼细胞。

 

艾美捷MTT细胞增殖检测试剂盒结果示例

下图显示了CytoSelect的典型结果™ MTT细胞增殖试验。以下数据仅供参考。该数据不应于解释实际后果 

41.png

图:人HEK 293细胞密度。HEK 293细胞以不同密度接种并允许其生长24小时。加入CytoSelect MTT细胞增殖后测定试剂,然后将细胞在37℃和5%CO2下孵育3小时,并用

洗涤剂溶液3小时。

 

艾美捷MTT细胞增殖检测试剂盒测定方案:

1.制备含有0.1-1.0 x 106的细胞悬液培养基中的细胞/ml

2.将每孔100μL加入96孔细胞培养板或每孔500μL加入24孔细胞培养物中有或没有待测化合物的板。细胞在37°C5%培养24-96小时加湿培养箱中的二氧化碳。

3.加入10μlCytoSelect™ MTT细胞增殖测定试剂,如果使用96-孔板,或24孔板的每个孔50µL

4.37°C5%CO2下孵育平板3-4小时,直至可见紫色沉淀(细胞在光学显微镜下可以更精确地观察到沉淀物)

5.96孔板的每孔中加入100μL去污剂溶液,或在24孔板的每孔中加入500μL去污剂溶液盘子。

6.在室温下孵育2小时至避光过夜。

注意:在井中与洗涤剂溶液长时间孵育可能导致沉淀或浑浊可以增加背景。如果观察到沉淀,将板在37℃加热10-20分钟并搅拌溶解沉淀物。

7.使用540-570nm作为主波长读取吸光度。

 

引用文献(部分):

1. Yu, Z. et al. (2021). Receptor interacting protein 3 kinase, not 1 kinase, through MLKL-mediated necroptosis is involved in UVA-induced corneal endothelium cell death. Cell Death Discov.

7(1):366. doi: 10.1038/s41420-021-00757-w.

2. Koga, Y. et al. (2021). DNA-Aptamer Raised against Receptor for Advanced Glycation End Products Improves Survival Rate in Septic Mice. Oxid Med Cell Longev. 2021:9932311. doi:10.1155/2021/9932311.

3. Uranowska, K. et al. (2021). A chondroitin sulfate proteoglycan 4‑specific monoclonal antibody inhibits melanoma cell invasion in a spheroid model. Int J Oncol. 59(3):70. doi:10.3892/ijo.2021.5250.

 

来源:https://www.amyjet.com/products/CBA-252.shtml


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