艾美捷人乳铁蛋白ELISA试剂盒化验规程介绍

乳铁蛋白（LF）是一种具有抗菌活性的多功能铁结合蛋白。它存在于牛奶和其他粘膜中分泌物。众所周知，乳铁蛋白是抵抗感染和炎症的先天防御的一部分，也具有功能调节铁吸收。

艾美捷Kamiya人乳铁蛋白ELISA是一种高度灵敏的双位点酶联免疫测定（ELISA）人类生物样品中乳铁蛋白的测定。仅供研究使用。不用于诊断程序。

艾美捷Kamiya人乳铁蛋白ELISA试剂盒试剂制备：

1.浓缩稀释剂

提供的稀释剂溶液为5倍浓缩液，必须用蒸馏水或去离子水稀释1:5。

2.浓缩洗涤液

提供的洗涤液为20X浓缩液，必须用蒸馏水或去离子水稀释1:20。结晶当储存温度较低时，精矿中的形成并不罕见。浓缩液加温稀释前30-35°C可溶解晶体。

3.酶抗体结合物浓缩物

通过添加10µL计算每个微量滴定板测试条所需的工作标记溶液量酶抗体缀合物至990µL或1X稀释剂，用于每个测试条。立即稀释在使用前，并防止光线照射。混合均匀，但要轻柔。避免起泡。

4.TMB基板溶液

随附随用。

5.微量滴定板

随附随用。打开微量滴定袋并从袋中取出板。移除所有将不用于分析，将其放回袋中，并与干燥剂一起重新密封。

6.人乳铁蛋白校准仪

将1.0 ml蒸馏水或去离子水加入冻干人乳铁蛋白校准仪中，并轻轻混合直至溶解。校准器现在的浓度为18.40µg/mL（重新配制的校准器应为如果打算将来使用，则立即冷冻）。需要准备人乳铁蛋白校准品使用前立即（见下表）。在每一步之间充分混合。避免起泡。

艾美捷Kamiya人乳铁蛋白ELISA试剂盒化验规程：

样品的稀释：

由于测定的高灵敏度，在用于正常测定之前，应稀释每个样品。A 1:20血清或血浆稀释适用于大多数样本，而母乳样本可能需要稀释1:50000。

对于产生校准曲线范围外结果的样品的绝对定量，取较小值或较大值可能需要稀释。如果不确定样品水平，则在之前用一个或两个代表性样品进行连续稀释强烈建议运行整个板。

为了制备1:20稀释的样品，将20µL样品转移到380µL 1X稀释剂中。这样可以得到1:20的稀释度。混合非常为制备1:50000稀释的样品，将5µL样品转移至495µL 1X稀释剂中。这给你一个1： 100稀释。充分混合。然后，将2µL的1X稀释剂转移至998µL，稀释1:100的样品。对样品进行1:50000稀释。在每个阶段充分混合。

来源：https://www.amyjet.com/products/KT-489.shtm