艾美捷丙二醛(MDA)elisa检测试剂盒检测原理和注意事项
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下一篇 2023-04-14 15:32:50/ 个人分类:生化试剂
艾美捷丙二醛(MDA)elisa检测试剂盒#EKF60157检测原理:
该试剂盒基于竞争ELISA检测方法。该试剂盒中提供的微量滴定板已预先涂有目标在反应过程中,样品或标准品中的靶标与固相载体上固定量的靶标竞争用于靶特异性的生物素化检测抗体上的位点。洗涤过量的缀合物和未结合的样品或标准品并将HRP链亲和素(SABC)加入每个微孔板孔中并孵育。然后TMB基板溶液添加到每个井中。通过加入硫酸溶液和颜色变化终止酶底物反应在450nm的波长下用分光光度法测量。然后通过以下方式确定样品中目标的浓度将样品的OD与标准曲线进行比较。
丙二醛(MDA)elisa检测试剂盒组成:
丙二醛(MDA)elisa检测试剂盒操作注意事项
1.为了检验实验操作的有效性和样品稀释比例的适当性,进行中试建议使用标准品和少量样品。
2.打开后和使用前,请保持盘子干燥。
3.在使用试剂盒之前,旋转试管,并将所有组件降到试管底部。
4.TMB试剂应避光保存。
5.洗涤过程非常重要,不完全洗涤容易造成假阳性和高背景。
6.对于标准测试和样品测试,建议使用双孔分析法。
7.在测定时不要让微孔板干燥,因为干燥的平板会使平板上的活性成分失活。
8.不要重复使用尖端和管道,以避免交叉污染。
9.请不要将试剂混合在我们公司的不同试剂盒中。不要混合其他制造商的试剂。
10.为了确保准确的结果,在培养步骤中有必要适当粘附平板密封剂
需要但未提供的材料
1.微孔板阅读器(波长:450nm)
2.37°C培养箱
3.自动洗板机
4.精密单通道和多通道移液管及一次性吸头
5.清洁管道和埃彭多夫管道
6.去离子水或蒸馏水
洗涤
手动:在不接触侧壁的情况下丢弃板中的溶液。用吸水滤纸或其他东西拍打滤板吸收性材料。用350毫升洗涤缓冲液完全填充每个孔,浸泡1到2分钟,然后从板,并将板拍打在吸收性滤纸或其他吸收性材料上。
自动:抽吸所有井,然后用350ul洗涤缓冲液洗涤平板。最后一次清洗后,翻转盘子,拍上盘子吸收性滤纸或其他吸收性材料。建议将垫圈设置为浸泡1分钟。(注:设置针头的高度;确保液体可以被完全吸干)
样品稀释:
用户应估计测试样品中目标蛋白的浓度,并选择适当的稀释因子以使稀释的目标蛋白浓度落在试剂盒的较佳检测范围内。用提供的稀释剂稀释样品缓冲区,并且可能需要进行几次试验。试样必须与稀释缓冲液充分混合。还有标准曲线样品应在实验前制作。如果样品浓度非常高,先用PBS稀释样品,然后用样品稀释液稀释样品。
来源:https://www.amyjet.com/products/EKF60157.shtml
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