Advanced BioMatrix人重组原弹性蛋白粘附实验&制备步骤

弹性蛋白前体物Tropoelastin是弹性蛋白分子的前体。Tropoelastin通常不以其原生状态存在，因为它在细胞合成后立即发生交联，并在被导出到细胞外基质期间发生交联。弹性蛋白存在于身体的许多组织中，包括皮肤、动脉壁和韧带。弹性蛋白聚集体负责皮肤、动脉壁和韧带的伸展特性，弹性蛋白与几种遗传疾病有关，包括松弛皮肤症（皮肤弹性丧失）和弹性皮肤症（类似于松弛皮肤症，但皮肤真皮层中有葡萄状弹性蛋白聚积）。弹性蛋白赋予组织和器官强度和弹性。这种蛋白质的异常和高度特征性的氨基酸组成使其具有很强的疏水性。它含有三分之一的甘氨酸氨基酸和几种赖氨酸衍生物，这些赖氨酸衍生物用作蛋白单体之间的共价交联。因此，弹性蛋白是一个三维网络，两个交联点之间有60-70个氨基酸。这种分子结构对其弹性特性、不溶性和抗蛋白水解作用起决定作用。Advanced BioMatrix的人源Tropoelastin是通过重组加工方法获得的。该产品以无菌、冻干粉末的形式提供，每支含1毫克。

艾美捷人重组原弹性蛋白，1 mg #ABM-5052-1MG特性鉴定/纯度：

使用电泳（SDS-PAGE）定性评估弹性蛋白的身份和纯度。

数量：弹性蛋白以1毫克装在冻干粉末瓶中供应。

无菌性：无生长 - 最终产品通过低剂量电子束辐射终端灭菌。

内毒素：<10 EU/ml存储：该产品在溶解前存储在-20°C，并在冷冻胶冰包装中发货。建议在重新溶解后将产品存储在2-10°C。

稳定性：产品在-20°C存储时的货架寿命为24个月。在重新溶解后，产品在2-10°C存储时的货架寿命为3个月。

人重组原弹性蛋白细胞粘附实验：

为展示生物活性，将人体真皮成纤维细胞播种在涂有弹性蛋白的表面上，在无血清条件下。所有表面都用含有1%牛血清白蛋白（BSA）的溶液阻断。细胞然后被允许在37°C下附着一个小时。结果显示弹性蛋白具有显著的细胞附着生物活性。对照表面只显示出极少的细胞附着。

注意事项和免责声明：本产品仅供研发使用，不适用于人类或其他用途。请查阅材料安全数据表以获取有关危害和安全操作规范的信息。

人重组原弹性蛋白制备步骤：

1. 向含1毫克弹性蛋白的血清瓶中加入1毫升无菌0.25%冰醋酸溶液。

2. 轻轻混合至物质完全溶解。溶液可能仍然略显混浊。

3. 如有需要，将所需量的溶液从血清瓶转移到稀释容器。使用无菌0.25%冰醋酸溶液进一步稀释至所需浓度。典型的工作浓度范围可从1到50 μg/ml不等。注意：将这些建议作为指导，确定您培养系统的最佳涂层条件。

4. 向培养表面加入适量稀释后的弹性蛋白物质。

5. 在室温或37°C下覆盖孵育1-2小时。

6. 孵育后，吸去任何剩余物质。

7. 用无菌dH2O小心冲洗涂层表面，避免划伤表面。

8. 涂层表面已经可以使用。如果保持无菌性，也可以在2-10°C湿润或风干保存。注意：为保持无菌性，在层流罩中采用无菌技术进行所有操作。

人重组原弹性蛋白文献参考：

J. Holst, S. Watson, M. Lord, S. Eamegdool, D. Bax, L. Nivison-Smith, A.Kondyurin, L. Ma, A. Oberhauser, A. Weiss & J. Rasko, “Substrate elasticityprovides mechanical signals for the expansion of hemopoietic stem andprogenitor cells”, Nature Biotechnology Volume 28, Number 10, October2010, Pages 1123-1130.

Beth A. Kozel , Hiroshi Wachi§, Elaine C. Davis¶, and Robert P. Mecham,Domains in Tropoelastin That Mediate Elastin Deposition in Vitro and in Vivo,J. Biol. Chem., Vol. 278, Issue 20, 18491-18498, May 16, 2003

艾美捷科技是Advanced BioMatrix的中国代理商，为科研工作者提供优质的产品与服务。

https://www.amyjet.com/products/ABM-5052-1MG.shtml