脂质体转染试剂:特别配制,毒性低,转染效率高

上一篇 / 下一篇  2024-04-18 16:27:41/ 个人分类:生化试剂

艾美捷脂质体转染试剂ABS-G2500是一种新型的阳离子脂质体转染试剂,毒性低,转染效率高。对多种类型的细胞和培养板都具有高转染效率。

单位:1.0 毫升

存储条件:存储于4ºC。请勿冷冻。

特点:Z小毒性

 

脂质体转染试剂应用:

1、非常适合悬浮细胞(左图)

2、倍更高的表达式(右图)

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左图:abmSusfectin™转染试剂可以高效转染悬浮细胞。使用Susfectin™转染试剂(目录号G4000),用乱序siRNA-GFP慢载体(目录号LV015-G)转染HEK293悬浮细胞。

右图:与PEI相比,Susfectin™的表达高出2倍。使用竞争转染试剂Susfectin TM(目录号G4000)或线性PEI转染CHO细胞。使用ELISA定量上清液中的重组抗体水平。

 

脂质体转染试剂使用方法:

请使用以下条件作为指导,以在6孔板或35毫米培养皿中转染哺乳动物细胞。

1. 在转染前1824小时,以70%的密度播种细胞。对于悬浮细胞,以5 x 10^5 细胞/毫升的密度播种。

2. 对于每个转染样本,请按以下方式准备复合物:

溶液A:将2.0微克的DNA稀释到100微升无血清、无抗生素的培养基中。

溶液B:在使用前通过弹动试管混合DNAfectin™ Plus,然后将6-10微升的DNAfectin™ Plus稀释到100微升无血清、无抗生素的培养基中。

在室温下孵育溶液A和溶液B 5分钟。

3. 合并溶液,轻轻混合以确保均匀分布,并在室温下孵育20分钟。

注意:复合物在室温下稳定3-5小时。

4. 向每个DNA-转染复合物中加入0.8毫升无血清培养基,并通过剧烈弹动试管充分混合。

5. 抽吸每个孔中的所有培养基,然后将1.0毫升的转染试剂复合物直接加入到每个孔中(对于贴壁细胞)。对于悬浮细胞,收集细胞并以300xg离心以收集细胞沉淀,用1.0毫升转染复合物重悬。然后将细胞和转染复合物转移到6孔板中。孵育细胞。

6. 5-8小时后,移除转染溶液,加入2.0毫升完整培养基(含血清和抗生素)。继续孵育细胞。

7. 48-72小时后,可以使用适当的检测方法分析转基因的表达,或继续进行稳定细胞系的生成。

8. 制造稳定细胞系:在存在选择标记的情况下,以与杀伤曲线确定中使用的密度相同的密度进行细胞传代。

 

abmSusfectin转染试剂是特别配制的,用于将DNA转染到真核悬浮细胞中,而无需去除血清/培养基。这种简化的工作流程使Susfectin成为转染CHO293细胞的Z佳选择。

 

https://www.amyjet.com/products/ABS-G2500.shtml


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