瘦肉精

上一篇 / 下一篇 2013-07-09 12:24:35/ 个人分类：生活感言

瘦肉精（盐酸克伦特罗）

背景
2001年我刚毕业时，第一份工作在上海**研究所检测中心。
当时检测中心分两部分，理化测试和微生物测试，微生物部分项目非常单一，也就是菌落总数，大肠菌群，当时还有商业无菌测试。
理化部分的测试项目也只有基础的营养指标，蛋白质，水分，脂肪等，比较高级的就是原子吸收测定一些重金属了。
但其实研究所还有很多很好的测试仪器，就是没人用，有些已经坏了，无法使用，由于型号老旧，不能维修。
其中有日立的荧光分光光度计，配置很全，以前以前有老师做过维生素的测试，现在已经不用，我是了几次开机，已经不能很好的使用了。
Water的液相色谱，配紫外，视差，荧光，自动积分仪，功能很强大。当时在做防腐剂（苯甲酸，山梨酸），色素（五种）的测定。这台仪器是我色谱的入门工具。
日立的氨基酸分析仪，已经坏了。
惠普的气相色谱5890，是上分厂和惠普合资的产品，填充柱，做甜蜜素，我在上面做了不少方法，到我离开，还在用，可见当时仪器的质量。
英国那个牌子的气相，70年代，研究所电工（忘了姓什么）修好，更换了很多电子管（像小灯泡），配有ECD，做DDT,666. 很好用，后来来了新GC就淘汰了，很可惜。

01年研究所改制，政府不再给补助，日子很难过，当时我的导师还为我担忧。
刚好上海市政府开始抓食品安全，检测中心申请上海市**检测中心，主要测试**，01年检测中心得到市政府专项资金购买了一些新设备，安捷伦GC 6890，GC/MS 5973，HPLC 1100，因为没有别的人肯去用，肯去搞，这些新设备也成了我的学习工具。

当时瘦肉精中毒事件很多，我们领导也希望能由此能力，打开一片天。

我们先在WATERS液相上尝试了方法，但是紫外检测器的响应太低，而且无法进行有效定性（只能依照保留时间），所以并不是特别合适。后来新的安捷伦1100到货后，又有一批新柱子，而且DAD的定性功能带来很大的信心，阳性确认十分方便，方法开发的速度加快很多，所以方法就转到了新的仪器上。

当时参考的方法是上海兽药所写得一个地方标准，后来经过摸索，自己做了新的方法用于日常大批量的测试，效果很好。

描述
兽药所的地方标准：
猪肝或猪肉加乙酸乙酯饱和的盐酸溶液，匀浆后离心，取溶液，调pH=10，加甲苯二氯甲烷溶液提取，有机溶液浓缩5mL，过氧化铝柱，10mL盐酸溶液洗脱，蒸干盐酸溶液，加1mL盐酸溶液溶解，过滤后上机。
问题：
匀浆提取时样品和溶液容易变成浆状，无溶液分离，即便离心也无法分离。在继续加入提取溶液时有时可以等到溶液，但不重复，猪肝还好，猪肉会成半透明的胶状物。只能重复加溶液提取。
有机溶液用甲苯二氯甲烷，狠毒，当时也不注意，也没人提醒，每天下班昏昏沉沉。
盐酸洗脱液蒸干，当时用电热板，不好控制，水浴又很慢。
提取和净化效果很好，样品溶液很干净。但测试很费时间，需要用到的步骤也比较多。

随着样品量加大，需要更简便的方法，根据盐酸克伦特罗的性质，溶于酸，碱性时可被有机溶剂萃取，DAD上的吸收谱图很特征，不易出现假阳性这些特点开发了新的方法：
样品加高氯酸溶液匀浆，沉淀蛋白，乙醚去脂，调Ph=12，加乙醚提取，蒸干乙醚后用盐酸溶解，上机。
这样处理的好处在于：
样品的提取十分溶液，5%高氯酸有效沉淀蛋白质，在酸性条件下，乙醚可有效去除脂肪和其他脂溶性杂质，调至碱性后，克伦特罗可被乙醚萃取，而且共萃物很少，样品溶液同样很干净。
乙醚的沸点低，可以用水浴操作，且浓缩速度很快。萃取可在离心管中直接进行，无需用分液漏斗。
采用这个方法大大加快了样品处理的速度，和其他实验室比对的结果也是一致的，就是我们的检测采用DAD，只能做到10ug/kg. 而到03，04年已经有实验室采用LC-MS-MS，据说做到0.5ug/kg.

总结
分析化学就是这样，为了能解决实际问题。当然有时后也需要按照官方的，或大家公认的方法来做，如果采用自己的方法，做好做验证，当时对验证没有很清楚的概念，只做了些加标等，都在80%以上，也和别的实验室做了比对，确认是OK的，才采用到日常测试。

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