蛋白质分离纯化一条街：凝胶过滤层析用于样品前处理

凝胶过滤层析用于样品前处理过程包括以下几种情况：欢迎补充

1  蛋白质溶液脱盐处理：

①如蛋白质样品进行MALDI TOF MS分析前需要的脱盐处理，以降低盐分对目标蛋白离子化效率的影响；②蛋白质溶液盐析处理获得的目标蛋白需要脱盐处理；③离子交换或疏水层析得到的目标蛋白溶液也需要脱盐处理；

2  去除小分子标记物

在进行特殊基团衍生或处理后导致的溶液中残余的小分子，如自由巯基衍生后的剩余的衍生剂的去除等；

3  去除添加物或酶的保护剂

许多蛋白质尤其是酶制剂在冷冻保存时需要添加保护剂，在使用前需要将小分析添加物去除，大家从Sigma公司购买的酶制剂在使用前一定要注意有没有小分子保护剂，某些情况下（不是全部）添加物会影响我们的试验结果；

4  去除小分子抑制剂（欢迎补充）

5  缓冲液体置换

如目标蛋白进行酶解处理前的溶液需要更换为适合酶催化翻译的离子种类、离子强度和pH条件。

常用脱盐介质：

     Sephadex G25

粒径：90-260微米

排阻极限：~5000Da

pH稳定范围：2-13

特点：容量高，处理快速，高效

     Sephadex G10

粒径：60-160微米

排阻极限：~700Da

pH稳定范围：2-13

特点：适合多肽、寡糖类以及亲水性较强的蛋白溶液中脱除盐类、染料、同位素标记物，以及分子量范围较高的多肽质谱分析前脱盐等。