用于生物素标记抗体检测的HRP Streptavidin Conjugate

上一篇 / 下一篇 2013-09-13 14:33:50

用于生物素标记抗体检测的HRP Streptavidin Conjugate

辣根过氧化物酶链酶亲和素结合物可以用于生物素标记的抗体、核酸、蛋白或其它生物素标记分子的检测。具体用途包括Western blot、ELISA、免疫组化或免疫细胞化学、斑点杂交、化学发光检测等。
    HRP StreptavidinConjugate用高纯度的链酶亲和素和超纯的辣根过氧化物酶交联而成，确保产生最低的本底和最高的灵敏度。
      链酶亲和素的分子量为60kD，可以高度特异性地和生物素结合。链酶亲和素是一个4聚体蛋白，可以同时结合4个生物素分子。链霉亲和素，从Streptomyces adidinii中纯化获得，和鸡蛋清来源的Avidin(亲和素)在空间结构以及与生物素的亲和力方面具有高度的相似性。和Avidin不同的是，Streptavidin是一种非糖基化蛋白，并且基本不带电荷。Avidin的pI=～10.5，在中性pH条件下呈碱性。由于Streptavidin和Avidin相比在中性条件下不带电荷，因此Streptavidin的非特异性结合比Avidin低很多，这样检测时的非特异性背景就低很多。因此目前在生物素检测时通常使用Streptavidin替代Avidin。
    辣根过氧化物酶即horseradish peroxidase(HRP)，可以在Western、EMSA、Southern或Northern等检测时催化ECL类试剂(如ECL、BeyoECL等)产生化学发光，可以在ELISA时催化TMB产生蓝色，也可以在免疫组化、免疫细胞化学或Western blot检测时催化DAB产生棕色沉淀。
  1mg/ml的辣根过氧化物酶标记链酶亲和素用于各种常规用途的推荐稀释比例参考下表，实际实验操作过程中需根据具体情况适当调节辣根过氧化物酶标记链酶亲和素的稀释比例。