酵母(S.cerevisiae )直接转化试剂盒
酵母(S.cerevisiae )直接转化试剂盒
本品为出芽酵母(Saccharomyces cerevisiae)转化试剂盒。无需预先进行菌体离心、洗净操作,可直接向酵母培养液加入目标质粒和专用试剂,是一步即可完成转化的试剂。值得一提的是利用96孔板可导入多种检体,简单加入4850种重组体也成为可能,因而可进行染色体的筛选。
[转化效率]
向BY4737株导入pRS316时的转化效率。
向BY4737株导入pRS316时的转化效率。
|
形质转化效率 (cfu/μg) |
软管法 |
≥5,000 |
96孔感光板法 |
≥500 |
[试剂盒内容]
|
20次用 |
100次用 |
500次用 |
Sc Transformation Reagent |
500μl |
2.5ml |
12.5ml |
Carrier DNA(5μg/μl) |
50μl |
250μl |
1.25ml |
[操作方法]
■软管法
■
<酵母的培养>
2ml YPD培养基
↓←菌种接入,调制至OD600:0.01
↓←取1ml至14ml的试管中
↓←在28~30℃振荡培养,至OD600:3.5~5.0
培养酵母液……(A)
2ml YPD培养基
↓←菌种接入,调制至OD600:0.01
↓←取1ml至14ml的试管中
↓←在28~30℃振荡培养,至OD600:3.5~5.0
培养酵母液……(A)
<转化>
1.5ml的离心管
↓←将25μl质粒和试剂混合液混合
↓←加入25μl培养酵母液(A)在42℃恒温箱中放置2小时
↓←加入150μl灭菌水
1.5ml的离心管
↓←将25μl质粒和试剂混合液混合
↓←加入25μl培养酵母液(A)在42℃恒温箱中放置2小时
↓←加入150μl灭菌水
预处理
↓在28~30℃的恒温箱中放置2~3天
转化后的酵母
↓在28~30℃的恒温箱中放置2~3天
转化后的酵母
■ 96孔板法
96孔板
↓←加入25μl YPD培养基
菌种接入
↓在28~30℃情况下静置培养18~24
菌体悬浊
↓←将25μl质粒和试剂混合液混合
在37℃的恒温箱中放置2小时
5~10μl spotting
↓在28~30℃的恒温箱中放置2~3日
转化的酵母
*质粒·试剂混合液 (25μl /管, 25μl/孔)
↓←加入25μl YPD培养基
菌种接入
↓在28~30℃情况下静置培养18~24
菌体悬浊
↓←将25μl质粒和试剂混合液混合
在37℃的恒温箱中放置2小时
5~10μl
↓在28~30℃的恒温箱中放置2~3日
转化的酵母
*质粒·试剂混合液 (25μl /管, 25μl/孔)
·Sc Transformation Reagent…20μl ·质粒DNA………………………1μg ·Carrier DNA……………………2μl |
[保存条件]
-20℃保存
[产品资料]
上海西宝生物科技有限公司
张经理
电话:400-021-8151