HPLC中各种分离方法所对应的填料选择

1、反相（与离子对）方法
C18（十八烷基或ODS）----------- 普适性好；保留性强，用途广
C8（辛基） -----------与C18相似，但保留值稍小
C3，C4 -----------保留值小；大多用于肽类与蛋白质
C1【三甲基硅烷（TMS）】------保留值最小；最不稳定
苯基，苯乙基 -----------保留值适中；选择性有所不同
CN（氰基） -----------保留值适中；正相和反相均可使用
NH2（氨基） -----------保留性弱；用于烃类；欠稳定
聚苯乙烯基b -----------在1＜PH＜13的流动相中稳定；对某些分 离峰形好，柱子寿命长

2、正相方法
CN（氰基） -----------普适性好；极性适中；用途广
OH（二醇基） -----------极性大于CN
NH2（氨基） -----------极性大，欠稳定
硅胶b ------------普适性好；价廉；操作欠方便；用于制备LC

3、空间排阻方法
硅胶b -----------普适性极好；作吸附剂用
硅烷化硅胶 -----------吸附性弱，溶剂兼容性好；适用于有机溶剂
OH（二醇基） ------------欠稳定；在水SEC中使用（凝胶过滤）
聚苯乙烯基b ------------广泛用于有机SEC（凝胶渗透）；一般与水和极性大的有机溶剂不相容

4、离子交换方法
键合相 ------------稳定性与重现性均不好
聚苯乙烯基b -------------柱效不高；稳定；重现性好

a ：除另有说明，均为硅胶基质键合相
b ：此类填料为非键合相

另，在最佳的测试条件下，填充良好的HPLC色谱柱应具备的理论塔板数
微粒直径（um）----柱长（cm）---------塔板数N
10 ------------------------15 ------------- -----6000-7000
10------------ ------------25 -------------------8000-10000
5---------------------------10-------------------7000-9000
5---------------------------15 ------------------10000-12000
5 ------------- -------------25-------------------17000-20000
3----------------------------5---------------------6000-7000
3---------------------------7.5-------------------9000-11000
3---------------------------10-------------------12000-14000
3---------------------------15-------------------17000-20000