液相色谱法测定穿心莲制剂中脱水穿心莲内酯的含量

上一篇 / 下一篇 2010-04-30 14:46:26/ 个人分类：液相色谱法

　　【摘要】目的测定穿心莲胶囊中脱水穿心莲内酯的含量。方法采用HPLC法，色谱柱:AlltimaC18柱，流动相:甲醇:水(60:40)，检测波长:270nm，流速:1.0ml/min。结果在线性范围内，脱水穿心莲内酯的线性关系良好，平均回收率为99.8%。结论：方法简便、灵敏、准确、样品处理简便易行，可作为穿心莲制剂中的质量控制方法。

　　穿心莲为爵床植物穿心莲[AndrographisPaniculata(Brun.f.)Nees]的干燥地上部分。具有清热解毒，抗菌，抗蛇毒等功效。主要含二萜类内酯化合物，如穿心莲内酯、脱水穿心莲内酯等成分。本研究采用了HPLC法测定了穿心莲极细粉胶囊(以下简称穿心莲胶囊)中脱水穿心莲内酯的含量，现报道如下。

　　1 仪器与材料

　　1.1 仪器 Agilent1100系列高效液相色谱仪;超声波清洗器(上海超声波仪器厂)。

　　1.2 材料

　　脱水穿心莲内酯对照品(供含量测定用，中国药品生物制品检定所);穿心莲胶囊由广西锦亚制药厂提供;甲醇为色谱纯。

　　2 方法

　　2.1 色谱条件

　　色谱柱:AlltimaC18(150mm×4.6mm，5μm);流动相:甲醇:水(60:40);检测波长:270nm，流速:1.0ml/min，柱温:25℃。理论塔板数:按脱水穿心莲内酯峰计算不低于2000。

　　2.2 对照品溶液的制备

　　精密称取脱水穿心莲内酯对照品10mg，置于10ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，作为对照品储备液。精密量取上述溶液1.0ml，置25ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。

　　2.3 线性关系考察

　　精密吸取对照品溶液5、10、15、20、25、30μl注入色谱仪，以对照品基线构成之面积称峰面积。A=×σ×h=2.507σh=1.064Wh/2h>峰面积为纵坐标，进样量为横坐标，绘制标准曲线。回归方程;Y=-149.7+55568.6X，r=0.9998(n=6)，表明脱水穿心莲内酯在0.2～1.2μg范围内线性关系良好。

　　2.4 精密度试验

　　精密吸取对照品溶液10μl，连续进样6次测定，其峰面积的RSD为0.69%。

　　2.5 稳定性试验

　　精密吸取同一供试品溶液10μl，分别在0、2、4、6、8、10h进样测定，峰面积RSD=1.1%，表明室温条件下供试液在10h内稳定。

　　2.6 重复性试验

　　取同一批样品5份，按样品含量测定项下依法平行操作，测定每份样品中脱水穿心莲内酯的含量，结果RSD=1.25%.

　　2.7 加样回收率试验

　　精密称取已知含量的同批样品5份，精密加入一定量脱水穿心莲内酯对照品，按样品含量测定项下测定，平均回收率为 99.8%，RSD为1.87%。

　　2.8 样品含量测定

　　取本品10丸，研碎，混匀，精密称取1.0g，置100ml量瓶中，加入甲醇 50ml，超声30min，加甲醇稀释至刻度。过滤，取滤液用微孔滤膜(0.45μm)滤过，取续滤液进样10μl，按上述色谱条件测定。

　　3 讨论

　　脱水穿心莲内酯是穿心莲中所含的主要成分，《中国药典》2000版一部穿心莲项下脱水穿心莲内酯的含量测定使用薄层扫描法，而本试验选择液相色谱法，实验结果表明，该法具有快速、分离度好、重现性好、灵敏度高的特点，可用于穿心莲制剂的质量控制方法。