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蛋白序列分析
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下一篇 2008-05-12 15:25:28/ 个人分类:技术服务
蛋白序列分析
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蛋白质序列分析可获得蛋白质一级结构的信息。利用Edman降解测定蛋白质N-末端序列,在测定过程中,氨基酸残基依次与衍生化试剂(异硫氰酸苯酯)作用,从蛋白质N-末端顺序切割下来,形成稳定的氨基酸后进行分析鉴定。
微量蛋白质序列分析可用于确认新的蛋白质;鉴定重组表达的蛋白质结构的正确性,构建基因探针;鉴定多肽合成产物的结构。
样品要求:
仅含有单一蛋白链,蛋白质纯度大于97%。
不含干扰测定的物质,包括
1)影响Edman降解的反应条件
2)与衍生化试剂作用
3)与蛋白质N-末端残基发生作用
如:三羟甲基氨基甲烷(tris), 甘氨酸(glycine),胍(guanidine), 甘油(glycerol), 蔗糖(sucrose), 乙醇氨(ethanolamine), 十二烷基磺酸钠(SDS), 曲通(Triton X-100), 吐温(Tween), 硫酸铵(ammonium sulfate),各种游离氨基酸等。
3.样品量:样品浓度在0.1mg/ml左右,总量达到50pmol以上。
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