植物RNA的分离
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下一篇 2008-06-23 16:54:00/ 个人分类:RNA
1. 总RNA的分离
8Qobywy;`lgq0总RNA分离的方法很多,常采用的是异硫氰酸胍和b-巯基乙醇这两种RNase抑制剂来抑制RNase的活性,同时,异硫氰酸胍与十二烷基肌氨酸钠(sarcosyl)共同作用可以破坏核蛋白复合体,使RNA顺利地解脱出来溶进缓冲液。由于RNA在碱性条件下不稳定,因而在整个提取过程中体系始终保持酸性至中性,而在酸性条件下DNA极少发生解离,DNA同蛋白质一起变性后被离心下来,RNA则仍溶于上清缓冲液中,最后用异丙醇沉淀出RNA。 分析测试百科网9M |"iq"]O#y
【试剂与仪器】
?5[5f^Tue1h0(1)异硫氰酸胍溶液:
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U~e/rMG_04 mol/L异硫氰酸胍 分析测试百科网p+v%T^\
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25 mmol/LM柠檬酸钠(pH 7.0) 分析测试百科网!z!\J4C|tr
0.5%十二烷基肌氨酸钠