上海阿拉丁生化科技股份有限公司

20210330 蛋白纯化与分析检测技术


2021年03月30日 09:30

2021年03月30日 11:30

江正瑾,吴若瑜,徐颖,米建秋

安捷伦科技(中国)有限公司 美国布鲁克道尔顿公司(Bruker Daltonic Inc.)

生命科学  制药  临床  


内容简介

蛋白质是生物体含量丰富、功能复杂、种类繁多的生物大分子,其分离纯化方法已成为目前的研究热点之一。蛋白质在人们身体健康方面发挥着重要作用,并在各个领域中不断被广泛涉猎,其中较为突出的为医学领域和食品安全领域。蛋白质在功能方面极具特异性,换而言之,每一功能的特异性都将带来差别颇大的功效。因此,对蛋白纯化的相关研究进行分析探讨,具有重要的现实意义。

本次研讨会,分析测试百科网将邀请行业专家,与大家共同探讨蛋白纯化与分析检测技术,希望能对行业内工作者带来帮助和启发。

【日程安排】

时间
报告人
单位
报告题目
09:30-10:00
江正瑾 教授
暨南大学药学院
基于表位模拟肽的单克隆抗体药物富集纯化方法研究
10:00-10:30
吴若瑜
布鲁克质谱
4D-蛋白质组学技术应对蛋白质纯化中微量样本的检测挑战
10:30-11:00
徐颖 副教授
南京农业大学生命科学学院
重组蛋白的表达与纯化策略
11:00-11:30
米建秋
安捷伦
选择合适的色谱柱进行蛋白类生物治疗药物的LCMS分析

【报告简介】

基于表位模拟肽的单克隆抗体药物富集纯化方法研究

复杂生物体系中单克隆抗体的快速精准捕获对于降低抗体药物的生产成本和推动其临床个体化用药均具有重要意义。本研究受“抗原-抗体”作用的启发,针对抗体的不同特定位点(Fc区或Fab区)分别设计开发了Fc-仿生亲和肽和靶抗原表位模拟肽,并利用金属螯合等固定技术,将仿生肽高密度固定在聚合物基质表面,研制出不同仿生肽功能化聚合物材料。以乳腺癌治疗单抗Trastuzumab为例,我们设计开发出其靶抗原HER2的表位模拟肽HH24功能化聚合物材料,研究发现该材料能高效避免hIgG的干扰,从而精准识别人血样中目标抗体药Trastuzumab,而且对复杂体系中的其它杂蛋白和干扰物质表现出非常强的抗非特异性吸附能力。最后,利用该材料结合荧光分光光度法开发了新型Trastuzumab定量分析方法,并用于乳腺癌患者血清样品中Trastuzumab的快速定量分析。在此基础上,将特异性多肽识别理念拓展应用于非霍奇金淋巴瘤患者体内Rituximab 的多肽生物传感器的构建与临床应用,阐明了表位模拟肽识别技术的可拓展性。

4D-蛋白质组学技术应对蛋白质纯化中微量样本的检测挑战

微量蛋白质样本的检测对现今分子病理相关研究(如血浆、组织样本及穿刺样本检测)、新药开发、蛋白药物质量监控(如蛋白药物宿主残留蛋白分析)等十分重要,蛋白质样本不像基因可以透过PCR进行扩增,因此微量蛋白样本分析除考虑前端纯化方法开发外,亦必须考虑后端分析技术。基于布鲁克timsTOF Pro的4D蛋白质组学技术大幅度提高的峰容量、扫描速度和检测灵敏度,带来了蛋白质检测深度、检测周期、定量准确性等的全面提升,4D蛋白质组学技术已成为微量蛋白样本分析强有力的工具,可以很好地应对蛋白质纯化中微量样本的检测挑战。

选择合适的色谱柱进行蛋白类生物治疗药物的LCMS分析

在蛋白类生物治疗药物的的液相色谱质谱联用分析中,既需要考虑液相色谱的分离效率,也需要考虑质谱的响应。在流动相选择范围相对有限的前提下,如何选择合适的液相色谱柱是影响实验结果的关键因素之一。本节内容从以上问题出发,系统性讨论了反相色谱及尺寸排阻色谱与质谱联用分析蛋白类生物治疗药物的策略与实验细节。

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