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流式细胞仪检测原理

2021.5.30

一、原理

在正常细胞中,磷脂酰丝氨酸(ps)只分布在细胞膜脂质双层的内侧,而在细胞凋亡早期,细胞膜中的磷脂酰丝氨酸(ps)由脂膜内侧翻向外侧。annexin v是一种分子量为35~36kd的ca2+依赖性磷脂结合蛋白,与磷脂酰丝氨酸有高度亲和力,故可通过细胞外侧暴露的磷脂酰丝氨酸与凋亡早期细胞的胞膜结合。因此annexin v被作为检测细胞早期凋亡的灵敏指标之一。将annexin v进行荧光素(egfp、fitc)标记,以标记了的annexin v作为荧光探针,利用荧光显微镜或流式细胞仪可检测细胞凋亡的发生。

碘化丙啶(propidium iodide, pi)是一种核酸染料,它不能透过完整的细胞膜,但对凋亡中晚期的细胞和死细胞,pi能够透过细胞膜而使细胞核染红。因此将annexin v与pi匹配使用,就可以将处于不同凋亡时期的细胞区分开来。

二、注意事项

1、必须活细胞检测,不能用能破坏细......

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