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紫外分光光度法测定蛋白质含量实验

2018.8.07

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致力于为分析测试行业奉献终身

一、实验目的

1、 学习紫外分光光度法测定蛋白质含量的原理;

2、 掌握紫外分光光度法测定蛋白质含量的实验技术;

3、 掌握uv-1700pc紫外-可见分光光度计的使用方法并了解此仪器的主要构造。

二、实验原理

紫外-可见吸收光谱法又称紫外-可见分光光度法,它是研究分子吸收190nm~750nm波长范围内的吸收光谱,是以溶液中物质分子对光的选择性吸收为基础而建立起来的一类分析方法。紫外-可见吸收光谱的产生是由于分子的外层价电子跃迁的结果,其吸收光谱为分子光谱,是带光谱。

进行定性:利用紫外-可见吸收光谱法进行定性分析一般采用光谱比较法。即将未知纯化合物的吸收光谱特征,如吸收峰的数目、位置、相对强度以及吸收峰的形状与已知纯化合物的吸收光谱进行比较。

定量分析: 紫外-可见吸收光谱法进行定量分析的依据是朗伯-比尔定律:a=lgi0/i=εbc......

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本仪器采用冷原子吸收法,基于元素汞在室温下,不加热的条件下,就可挥发成汞蒸气,并对波长253.7nm的紫外线具有强烈的吸收作用,在一定的范围内,汞的浓度和吸收值成正比,符合比尔定律。直接测量出汞的含量、直接读取测量浓度。

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