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高效液相色谱紫外检测器日常使用那些事

通微
2021.1.21


前几期微课堂已给大家介绍了高效液相色谱仪的组成是由输液系统、进样系统、分离系统、检测系统、数据处理系统等几大模块组成。其中检测系统是液相色谱仪的眼睛,经液相色谱分离后的目标化合物依次进入到检测系统中进行检测,得到一定的信号值,从而得到样品中目标化合物的定性定量信息。一旦检系统出现问题,将导致样品的检测失败。因此平时规范操作使用液相色谱以及做好检测系统维护非常重要。本节微课堂给大家介绍常用的液相色谱检测器-紫外检测器的日常使用注意事项。


紫外检测器使用注意事项:


1. 为防止检测池池体堵塞,流动相用前过滤,尤其是含缓冲盐的流动相,用前需用不含盐流动相进行中间过渡。



2. 为防止气泡进入检测池,影响信号响应,流动相过滤后需先脱气后再接入液相色谱系统(具体脱气方法参见前几期微课堂)。且上液相色谱系统后,注意进行系统的排气操作,保证整个系统内没有气泡,防止气泡进入检测系统,造成异常基线信号响应。

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(检测池进气泡后表现在在基线出现锯齿状的峰,尤其做梯度的时候更容易出现。

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3. 为防止气泡进入检测池,影响信号响应,还需注意紫外检测器的管路连接:检测池的出口端应适当加一点反压(可以通过采用在检测池出口处连接细长管路实现如:175μm内径,50cm-80cm管路),通常反压在0.5MPa即可达到很好的抑制气泡产生的效果。注意反压不宜过大,否则会导致检测池的损坏。



4. 紫外检测器一般采用氘灯、钨灯作为光源,仪器开启后需要一定的预热时间,一般需平衡30min-60min,因此在使用紫外检测器时,建议提前打开仪器并开灯预热,待基线平稳后再进行样品分析。



5. 紫外检测器光源氘灯或钨灯的使用寿命有限,一般为2000 h, 使用一段时间后需注意更换,否则会影响目标化合物的信号响应。具体判断是否需要更换的标准,可通过开灯后观察光源能量值的大小进行判断,可参照不同厂家紫外检测器的使用说明进行。



上海通微分析技术有限公司集分析仪器研发、制造、销售与服务为一体,在提供用户分析仪器(如高效液相色谱仪、蒸发光散射检测器、毛细管电泳仪以及样品前处理设备等)的同时,也会提供包括色谱柱耗材在内的各种各样的配套产品。为用户提供全方位的周到服务!


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