SureFISH——挑战过去与未来

技术的更迭发展在医学领域是不可或缺的，新技术对病理科而言，意味着可以在更短的时间获得更高的工作效率，为临床医师提供更精确的诊断意见。SureFISH 作为新一代 FISH 技术，又是如何挑战传统，给我们带来便捷呢？

以往的 FISH 探针是基于 BAC 即细菌人工染色体技术生产的，因其技术的局限性会产生较高的杂交背景信号，表现为整个细胞核呈模糊的荧光，某种情况下还会产生其他非特异性信号。封闭剂同时也会抑制整体杂交作用从而造成信号抑制。

而安捷伦推出的 SureFISH 技术，其探针采用电脑设计，然后由安捷伦公司的高保真寡核苷酸文库合成( OLS )技术进行化学合成。那么采用这种方法所设计的探针其优点是什么呢？

• 其一，高批间一致性 =——无需细胞培养：SureFISH 探针的生产过程确保其具有高批间一致性。该过程中完全避免了 BAC 生物学探针生产过程中可能的批间差异的产生。

• 其二，高探针特异性——精确靶向目标区域：以电脑模拟方式设计探针可实现真正的设计灵活性。寡核苷酸( oligo ) 探针被设计为具有单碱基对分辨率，可精确靶向任意目标区域。探针的高精密度设计能够实现更高的探针特异性。

• 其三，高信噪比——无重复 DNA 序列：由于 SureFISH 探针由化学合成的寡核苷酸构成，因此不会出现高杂交背景和非特异性信号等问题。为确保每条 SureFISH 探针真正无重复序列并能够产生清晰信号，每条寡核苷酸都与整个人基因组进行了序列比对以验证靶标特异性。所有非特异性序列都将被剔除。因此，SureFISH 探针既无需进行封闭，也不会出现由封闭剂产生的信号抑制现象。

与传统的标准设计相比，安捷伦采用的 Micro-gap（微间隙）设计确保了更精准的信号共定位，从而确保探针的高特异性。

不仅如此，SureFISH 采用的杂交液也与传统不同。以往我们用的杂交液是用甲酰胺作用于碱基对间的氢键连接，最大的缺点在于反应时间久，通常需要过夜且有致畸毒性。SureFISH 采用 IQFISH 杂交液技术，其工作原理是以堆积的碱基对为目标，可以在4小时完成全部FISH实验过程，大大缩减了工作时间，提高了工作效率。IQFISH 杂交液采用的是更为安全的碳酸乙烯酯，所以因其无毒的特性，即便没有通风橱也可以进行实验操作，可以说使用起来更为灵活多变。

目前安捷伦公司作为唯一一家不使用 BAC 技术生产全面的 DNA FISH 探针的供应商，已经可以提供 800 多种探针，包括各种不同类型的探针：分裂探针、双融合探针和拷贝数探针，同时，安捷伦公司还能提供自定义探针订制服务。在未来，安捷伦公司更会不断挑战自我，不断优化 SureFISH 技术，以更好的服务于病理事业。

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