生物色谱柱讲堂 | 关于氨基酸分析的窍门与技巧（二）

上次我们讨论了有助于 AdvanceBio 氨基酸分析平稳运行的一些简单的预防性步骤。但对于某些偶尔出现的问题该怎么办呢？

首先，如果分离度下降，应当做哪些检查？

• 许多氨基酸样品（包括细胞培养基）无需样品前处理。然而，氨基酸浓度必须与检测器响应相适应。如果因峰宽过大而导致分离度不佳，可检验能否通过提高样品稀释倍数以获得更合适的响应值和更出色的分离度

• 在柱温箱中使用小体积热交换器以及较短的红色管线（内径 0.12 mm），在最大程度上减小柱外体积

• 仔细检查连接和接头，尤其是在连接新色谱柱或更换毛细管后不久发现问题。色谱柱连接不当可能引起分离度不佳。Agilent InfinityLab QuickConnect 快速连接接头是确保您每次都获得良好连接的一种简单的解决方案

• 可能到需要更换色谱柱

色谱图强度较低怎么办？

• OPA 或 FMOC 试剂可能已经变质，需要配制新的试剂

• 检查样品瓶内插管中是否存在气泡。虽然听起来不可思议，但这的确可能发生。特别是当 FMOC 标记的氨基酸表现正常，而 OPA 标记的氨基酸响应较低时（反之亦然），就很可能是由于样品瓶内插管中存在气泡。这时只需轻击内插管侧面即可排出气泡

  

这些故障排除技巧大多针对氨基酸分析方法的实施过程。如果问题持续存在，则可能需要排查液相色谱仪的故障或样品本身的问题。

在下一期的生物色谱柱讲堂中，我们将聊聊如何节省分析时间。对于一两个样品，运行时间缩短几分钟可能没有太大的影响，而需要分析的样品数量越多，累计节省的时间和流动相就会越多。敬请关注

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