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Southern Blot是检测基因组样本中特定DNA序列的一种方法。主要原理是根据碱基互补配对原则,具有一定同源性的两条核酸单链在适宜环境中可杂交形成双链。通过凝胶电泳分离经限制性内切酶消化的待检DNA分子,转移至尼龙膜或其他固相支撑物上,固定后与标记好的探针进行杂交,利用***自显影或酶反应显色, 从而检测特定DNA分子的含量。
Southern Blot实验流程
1) 基因组提取:基因组要求完整性好,纯度高
2) 基因组酶切
3) 电泳分离酶切好的DNA样品: 20~40ug/泳道, 25-30V稳压电泳12-24h。
4) 转膜
5) 探针制备
6) 预杂交
7) 杂交
8) 检测
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注:该产品未在中华人民共和国食品药品监督管理部门申请医疗器械注册和备案,不可用于临床诊断或治疗等相关用途