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服务名称: 实时荧光定量PCR服务
技术原理
Real-time PCR技术,是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号累积实时监测整个PCR进程,zei后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。利用荧光信号的变化实时检测PCR扩增反应中每一个循环扩增产物量的变化,通过Ct值和标准曲线的分析对起始模板进行定量分析。
实时荧光定量PCR技术具有特异性强,有效解决了PCR污染问题、自动化程度高等特点,做到PCR每循环一次就收集一个数据,建立实时扩增曲线,准确地确定Ct值,从而根据Ct值确定起始DNA拷贝数,做到了真正意义上的DNA定量。
服务流程(含逆转录)
1、RNA的提取
2、DNase I 消化样品RNA 中的DNA
3、RNA琼脂糖凝胶电泳
4、RNA反转录为cDNA
5、引物设计合成、探针设计合成(探针法)
Real-Time PCR引物设计的要求
① Tm=55~65 oC
② GC=30~80%
③ PCR扩增产物长度:引物的产物大小不要太大,一般在80~300 bp之间都可。
④ 引物的退火温度要高,一般要在60oC以上。选择特异性好,扩增效率高的引物。
实时荧光定量PCR服务信息由北京百民敬生物科技有限公司为您提供,如您想了解更多关于实时荧光定量PCR服务报价、型号、参数等信息,欢迎来电或留言咨询。
注:该产品未在中华人民共和国食品药品监督管理部门申请医疗器械注册和备案,不可用于临床诊断或治疗等相关用途