SCIEX Triple Quad™ 7500系统定量分析大鼠血浆中PROTAC 药物 ARV-110

前言 

ROTAC即靶向蛋白降解嵌合体（Proteolysis -Targeting  Chimeras）。PROTAC分子由三部分构成，分别是靶向目标蛋白的 配体、E3泛素连接酶配体和连接上述结构的连接器。PROTAC分子 在进入细胞后，目标蛋白配体可特异性的与相应的靶蛋白结合， 另一端可以募集E3连接酶，E3连接酶可介导泛素结合酶E2对目标 蛋白配体泛素化。被泛素标记的目标蛋白可被蛋白酶体识别并降 解。ARV-110（Bavdegalutamide）是一种治疗转移性去势抵抗性前 列腺癌的PROTAC药物，目前的报道显示其在临床试验中展现出持 续的抗肿瘤活性和患者获益证据[1]。 

传统小分子需要知晓靶蛋白的内在位点和机制来结合然后起 效，而PROTAC则不用重视靶蛋白本身机制，无需竞争位点，只要 结合上就直接将靶蛋白泛素化标记后降解[2]。由于它的机制特殊， 仅需要少量就可发挥药效，用量常常是纳摩尔级别，这也给它的 安全性和活性评价带来一定难度。

本方法采用沉淀蛋白后再吹干复溶的方式进行前处理， 通过 SCIEX Triple Quad™ 7500系统对大鼠血浆中PROTAC药物ARV-110进 行直接定量，定量限（LOQ）为5 pg/mL，方法特点如下： 

1. 使用 SCIEX Triple Quad™ 7500系统，能够实现快速分析、操作简 单的同时获得检测灵敏度高的 LC-MS/MS方法。

2. 采用高比例有机相沉淀蛋白，再吹干复溶，有效实现对样品净 化的同时提高通量，方法开发周期短、开发成本低、特异性 强。

3. 方法检测灵敏度高（LLOQ: 5 pg/mL），较宽的线性范围 （5~5000 pg/mL）以及良好的定量重现性（RSD < 5%）。