双荧光素酶报告基因检测

                              miRNA是从真核基因组转录形成的非编码单链小分子RNA，其序列高度保守。miRNA几乎与所有细胞的功能和生物体生命过程有关，通过与靶mRNA的结合，影响目的基因的表达。用生物信息学方法准确快速地预测 miRNA的肥基因，可以为研究 miRNA功能提供线索。
       载基提供 miRNAE靶基因的预测与验证相关课题服务，通过荧光报告素酶活性检测，结合软件预测及蛋白验证，提高靶点预测的精确性及可行性。

  1.用 Promega公司特有 psiCHECK质粒;
  2.所用的 Luciferase双荧光报告系统，可以得宽泛的线性定量围与极高的灵敏度；
  3. 可免费使用我司细胞库已有细胞，无需购买；
  4.采用瞬时转染技术，操作简便、快速，周期短，适用绝大多数细胞类型。


 1、提供 miRNA名称或 miRNA mimics化合物或由世宸合成
 2、 Gene ID或者基因3’UTR序列信息

靶基因预测 使用软件对 miRNA的靶基因进行预测或者根据靶基因对作用的 miRNA进行预测;↓  质粒构建 •提供 miRNA mimics 或者构建pri- miRNA质粒或者慢病毒、腺病毒病毒包装;
•提供 miRNA  inhibitor或者构建miRNA干扰质粒或者慢病毒、腺病毒包装;
•构建靶基因的3’UTR野生型和突变型荧光素响报告基因质粒；  ↓  细胞转染 将构建好的质粒和提供 miRNA mimics或者 miRNA inhibitor分组共转染293T等工具细胞； ↓  荧光素酶检测 使用双荧光素酶或者单荧光素酶试剂盒检测，比较处理组和对照组的荧光素酶活性，从而获得 miRNA对靶基因的作用数据。

 

1. 报告载体psiCHECK-2 Vector

 

2. 双荧光素酶检测
 

 

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注：该产品未在中华人民共和国食品药品监督管理部门申请医疗器械注册和备案，不可用于临床诊断或治疗等相关用途