白屈菜的理化鉴别介绍
(1) 化学定性 取粗粉末5g，用氨化的氯仿20ml 浸泡过夜，滤过，氯仿液分为2份，一份留作薄层点样，另一份挥去氯仿，以1%盐酸2ml溶解，放入试管中，滴加改良碘化铋钾试液，溶液立即产生红棕色沉淀。 (生物碱反应)
(2) 薄层层析 样品制备：同“化学定性”项。也可以将“化学定性”项中氯仿浸提过的药渣，充分挥去溶剂，再以甲醇浸泡过夜，滤过，滤液浓缩至2ml，点样于硅胶G薄层板(青岛产，以0. 5%氢氧化钠溶液铺板，于120℃烘烤4小时以上)上。氯仿浸出部分用己烷-氯仿-甲醇(6：3：0.3)或甲醇浸出部分用氯仿 -甲醇(9 ： 1)展开，氨蒸气饱和，展距10cm。氯仿浸出液用白屈菜碱、四氢黄连碱、白屈菜红碱、血根碱作对照，在紫外光灯 (254～365nm)下观察，结果，白 屈菜根提取物中4种生物碱均被检出，而地上部分的提取物中未检出白屈菜红碱。甲醇提取物用小檗碱和黄连碱作对照，以改良碘化铋钾试剂喷雾，结果，白屈 菜根提取物中2种生物碱均被检出，而地上部分提取物只检出黄连碱。
(3) 纸层析 取粉末0.1g，用1%柠檬酸溶液饱和的丁醇10ml浸泡1小时，并时时摇动，过滤，滤液用圆心纸层析法以水饱和的正丁醇饱和滤纸在1小时后展开30～45分钟，取出，干后在紫外光灯下观察，显黄、黄绿、绿和红色等4种色带。
(4) 含量测定①白屈菜碱的测定：比色法 将样品先以硫酸的甲醇溶液提取，提取液蒸去甲醇后，酸液用氢氧化钠溶液中和并呈碱性，以氯仿提取，再酸化提到水相，然后再以氢氧化钠溶液碱化以氯仿提取，蒸去氯仿，残渣溶于甲醇并调成一定体积。取一定量此溶液点于预先以丙酮-甲酰胺(7：3)处理过的滤纸上，以正丁醇-醋酸-水(4：1：5)展开，分离后白屈菜的斑点用含有金莲橙OO(Tropaeolin OO)的pH4醋酸盐缓冲液洗脱，然后用氯仿提取有色复合物(白屈菜碱与染料的结合物)，氯仿层酸化后测定释放出来的染料的颜色浓度，在515nm进行比色。
（5）紫外分光光度法 取粉末用氯仿-油酸(99：1)提取，浓缩液点于硅胶G薄层板上，以氯仿-丙酮-乙酸乙酯-甲苯(2：1：1：1)展开，然后从薄层上挖取白屈菜 的斑点，用甲醇提取，并在293nm处测吸收度。
（6）碘量法 取粉末3g用70%乙醇30g室温振摇2 小时，过滤，取25g滤液蒸去乙醇，加入10%硫酸溶液 10滴，并加水到10g，过滤，取5g滤液用10%氢氧化铵溶液1ml碱化后以25g氯仿提取15分钟，加黄芪胶振摇，用棉花过滤，取20g滤液蒸干残渣溶于0.1N硫酸溶液中，加热除去氯仿，并用0.1N硫酸溶液稀释到 10ml，取此液一定量(相当于0.5g样品)与10%硫酸溶液2ml和0.1N碘-碘化钾溶液2ml混合，放置2分钟后分出沉淀，溶于甲醇25ml(Ⅰ)中，用0.01N硫代硫酸钠标准溶液滴定(1ml 0. 01N硫代硫酸钠≈ 0.882 5mg白屈菜碱)。(Ⅰ)的溶液也可在470nm处测定吸收度，此法较灵敏，样品中其他生物碱不干扰。
（7）酸碱滴定法 取样品用70%乙醇提取，浓缩后用硫酸酸化，过滤，用15%氢氧化钠溶液碱化后以氯仿提取，提取液浓缩后加一定量0.1N盐酸溶液，并置于水浴上加热除去氯仿，然后用0.1N氢氧化钠溶液滴定，以甲基红-甲基蓝混合液体为指示剂(1ml 0.1N盐酸≈0.0353g白屈菜碱)。
（8）血根碱的含量测定(比色法)：含血根碱样品的石油醚溶液用盐酸提取，然后用碱碱化后以氯仿提取血根碱，加30%三氯化锑氯仿溶液形成橙色，进行比色。方法：取一定量样品的石油醚提取液，置于分液漏斗中，加浓盐酸10ml，充分振摇后加入10ml蒸馏水，分出酸层，移置于另一分液漏斗中，石油醚层再用含 1～2滴浓盐酸的蒸馏水10ml提2次，合并酸液用1： 1氢氧化钠溶液中和，冷却后用氯仿提3次(10、10、 5ml)，合并氯仿液于小烧杯中，蒸干并在100℃烤箱中干燥，残渣用3ml干燥氯仿定量地移到比色管中，并加入30%三氯化锑的干燥氯仿溶液2ml，采用绿色滤光片进行比色。
（9）总生物碱的测定：取样品5g用60%乙醇提取 3次(100、100、50ml)，每次加热15分钟，合并提取液，减压浓缩至约50ml，加入浓硫酸30ml、醋酸溶液 30ml、锌粒4g，加热约1小时，直到溶液澄清，过滤，用少量含有硫酸的热水洗涤，冷却后以浓氨水中和，用乙醚提取3次(至提取液与碘化汞钾试剂不反应为止)，过滤，用无水硫酸钠干燥，滤器用乙醚洗，浓缩后，抽空干燥除去乙醚，并干燥至恒重，准确加入氯仿50ml溶解，吸取氯仿溶液25ml，蒸干，残渣溶于冰醋酸10ml 中，加入醋酐5ml和0.1%结晶紫指示剂3滴，用0.05 N或0.1N高氯酸冰醋酸溶液滴定到绿色为终点。总生物碱含量以白屈菜碱计 (1ml 0.05N高氯酸溶液≈ 0.017 65g白屈菜碱)。[2]
